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NF-κB是一个十分重要核转录因子,它的激活与很多生理过程相关,如细胞凋亡和细胞增殖。化疗在肿瘤治疗中占据着非常重要的地位,但是NF-κB在靶点肿瘤化疗中的相关分子机制仍然是不清楚的。细胞的凋亡遵循着严密的细胞信号转导。在细胞凋亡过程中,很多凋亡信号转导途径已经被发现,比如:线粒体途径,死亡受体途径,内质网途径,和抗凋亡途径(如NF-κB激活后所触发的抗凋亡信号),这些通路间又有串话,共同作用细胞凋亡。因此我们就NF-κB在靶向肿瘤化疗中的分子机制进行了深入研究。
在对化疗药物(紫杉醇和顺氯氨铂)诱导的细胞凋亡信号通路研究中,通过使用荧光共振能量转移和荧光重叠技术,我们发现紫杉醇诱导的细胞凋亡中,caspase-3的激活(13分50分钟)是在BID切割(15小时10分钟)和细胞色素c的释放(17~18小时20分钟)之前,而顺氯氨铂诱导的细胞凋亡过程中,BID切割(5小时40分钟)和细胞色素c的释放(7~8小时20分钟)先于caspase-3的激活(为14 h 20分钟)。同时western blot进一步证实了上述结果。综上所述,通过使用荧光分析技术对化疗药物所诱导的细胞凋亡信号通路进行分析,我们从时空角度发现,二个化疗药物紫杉醇和顺氯安铂诱导的细胞凋亡中凋亡信号因子的激活在时间顺序上是有显著不同的。因此,荧光分析技术能够让我们更好的从时间细节方面上去了解化疗药物诱导细胞凋亡过程中的信号转导机制。而且对以上二种化疗药物所介导的细胞凋亡信号转导通路的研究,为我们下一步研究以NF-κ B为靶向的肿瘤化疗分子机制提供了指导。
我们的以NF-κB为靶点的肿瘤化疗研究表明,在化疗药物(紫杉醇和顺氯氨铂)刺激癌细胞以后,NF-ΚB发生了激活,同时熊果酸能够显著的抑制化疗药物刺激下NF-κ B的激活,熊果酸所介导的抑制作用可以增加化疗药物对癌细胞的杀伤作用,并且极大的降低了达到相同治疗效果下化疗剂量。通过对比NF-κ B未抑制和熊果酸对NF-κ B抑制条件下化疗药物诱导细胞凋亡过程中凋亡因子的活性改变,我们发现熊果酸对化疗药物诱导的NF-κ B激活抑制后,在化疗药物诱导的细胞凋亡过程中,Fas/FasL-caspase-8凋亡信号通路发生了激活,并且化疗药物所介导的Bcl-2蛋白表达受到了显著的抑制。以上二个因素导致了熊果酸联合化疗刺激下BID切割的放大,并进一步加强了caspase-8-BID-Mitochondria-cytochrome c-caspase-3凋亡信号通路的激活。此外,使用不同剂量(包括低剂量)条件下的熊果酸都能抑制化疗药物所介导的NF-κB激活,增强化疗对癌细胞的杀伤。同时,熊果酸对癌细胞所介导的这种化疗增敏效果不适用于原代正常细胞。因此,对以NF-B为靶点的熊果酸联合化疗的分子机制研究能够让我们从分子和信号转导的角度去进一步认识以NF-κ B为靶点的化疗。熊果酸联合化疗的治疗方案具有很高的临床使用前景,因为它能够在不加强化疗药物对正常细胞的杀伤条件下,增强化疗药物对于癌细胞的杀伤的作用并且有效的降低化疗的剂量。此外,我们的一些初步研究说明低功率激光介导的细胞增殖依赖于NF-κB激活,并且这种NF-κB的激活与PI-3K/AKT通路激活有关。
综合所述,本文提出了NF-κB激活在肿瘤靶点化疗过程(紫杉醇和顺氯安铂)中的作用及相关分子机制,为研究NF-κB的分子机理做了新的探索,这种探索将有利于弄清楚NF-κB与化疗之间的联系性,为临床上使用以NF-κB为靶点的肿瘤化疗提供了新的理论参考。