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目的:1.了解腹膜透析相关性腹膜炎(Peritoneal dialysis-associated peritonitis,PDAP)的病原菌分布。2.应用微滴式数字PCR(Droplet Digital PCR,ddPCR)检测腹膜透析相关性腹膜炎的致病菌,旨在探讨微滴式数字PCR在检测PDAP中的临床应用价值方法:本实验研究方法分为两个部分。第一部分:回顾性分析2009年1月至2016年9月我院腹透中心发生的318例次腹膜透析相关性腹膜炎,对病原学种类进行分析。第二部分:1.根据回顾性分析我院腹透中心近8年发生的318例次腹膜透析相关性腹膜炎的病原菌分布情况,找出最常见的4种病原菌,分别为表皮葡萄球菌,金黄色葡萄球菌,大肠杆菌,粪肠球菌。2.根据相关参考文献设计4种实验菌种的特异引物探针。提取标准菌株DNA后,通过PCR验证引物可以扩增目的片段。3.收集30例腹膜炎患者的腹透液标本,分为两份,一份行传统细菌培养,另一份置于-80°C冰箱保存,用于后续数字PCR检测。标准菌株DNA提取液为阳性对照,无菌双蒸水(ddH2O)为阴性对照。结果:第一部分:腹透液培养阳性185例次,培养阳性率58.1%(185/318)。共培养得病原菌194株,其中G+菌131株(67.5%),G-杆菌49株(25.2%),真菌14株(7.2%)。G+菌以表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌和粪肠球菌为主,分别占25.9%、10.6%和8.4%。G-菌中以大肠杆菌为主占40.8%。第二部分:(1)传统细菌培养结果:30例腹膜透析相关性腹膜炎标本培养阳性率为43.3%(13/30)。13例培养阳性标本中包括:金黄色葡萄球菌3例,表皮葡萄球菌2例,大肠杆菌1例,溶血葡萄球菌2例,沃式葡萄球菌1例,铜绿假单孢菌1例,近平滑假丝酵母菌1例,阪崎肠杆菌1例,唾液链球菌1例。(2)数字PCR检验结果:针对4种细菌的特异性探针引物数字PCR检测结果均与传统细菌培养结果相同。细菌培养结果阴性的标本中数字PCR检测出金黄色葡萄球菌1例,粪肠球菌1例。(3)传统细菌培养时间为82.57±14.13小时,数字PCR检测时间约6.5小时。结论:1.本腹透中心导致腹膜透析相关性腹膜炎的致病菌G+菌以表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌和粪肠球菌为主,G-菌以大肠杆菌为主。2.数字PCR与传统细菌培养相比对于腹膜炎病原菌更加快速、具有较好的灵敏度和特异性。