羊膜防治心包缺损致粘连的作用研究

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目的:为心胸外科二次手术创造较好的局部手术环境,本研究在模拟开胸术基础上探讨新鲜人羊膜(human amniotic membrane,HAM)对兔心包缺损后修复心包膜的效果及对心脏与周围组织粘连的影响。方法:健康新西兰大白兔54只随机分为对照组、模型组(心包缺损)和HAM组(HAM修复缺损心包),其中对照组18只仅行开胸手术,心包不做其他处理;模型组18只行开胸术后造心包缺损模型后擦心外膜,HAM组18只行开胸术后造心包缺损模型后擦心外膜并采用新鲜双层HAM修复心包膜,操作完毕后均常规关闭胸腔,留置胸腔引流管。术后30、60和180天分别进行心功能检测、心脏粘连和纤维化程度的宏观和微观评价及心肌组织病理学检查。结果:(1)培养HAM后的培养基上清液中表达白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10),高表达基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9),不表达转化生长因子-β3(Transforming grow factor-β3,TGF-β3)。(2)术后观察180天,对照组和HAM组无动物死亡,模型组动物死亡率为15%,各组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。(3)第30天,三组动物心功能指标LVSP、LVEDP、HR、+Max d P/dt和-Min d P/dt之间比较,差异无统计学意义(P>0.05);第60天,对照组和HAM组的+Max d P/dt明显高于模型组(P<0.05);第180天,对照组、HAM组和模型组+Max d P/dt值分别为4684.61±452.03、4784.30±373.61和3044.69±379.90,-Min d P/dt值则为-3161.58±739.91、-3437.87±421.84和-2278.57±325.89,对照组和HAM组+Max d P/dt值和-Min d P/dt值均高于模型组(P<0.05),其余四项心功能指标三组之间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(4)第30天,对照组无明显粘连发生,HAM组和模型组的宏观粘连评分均为轻度,两组之间比较差异无统计学意义(P>0.05);第60天,HAM组宏观粘连评分值为1.33±0.52,明显低于模型组中度粘连的值2.5±0.55(P<0.05);第180天,对照组、模型组和HAM组宏观粘连评分值分别为0、2.4±0.55和1.17±0.41,即模型组宏观粘连评分值明显高于HAM组(P<0.05)。(5)HE染色后,显微镜下可见,模型组心肌与周围组织粘连随观察时间延长,呈进行性加重趋势,粘连纤维化分级1-2,炎症分级0-2,而HAM组心肌与周围组织粘连180天时明显减轻,粘连纤维化分级0-1,炎症分级0-1,粘连极易分离,HAM已大部分被吸收,三组心肌细胞损伤均不明显。结论:(1)HAM的分泌物中表达IL-10,高表达MMP-9,不表达TGF-β3。(2)直接剪除心包膜+摩擦心室壁和空气暴露所致的心包缺损模型,60天至180天出现明显的心脏与周围组织的轻中度粘连,且心功能呈进行性的心室收缩性能与舒张性能的下降。(3)发现HAM修补心包膜缺损的新西兰兔模型具有明显的防治心脏与周围组织器官粘连的良好疗效,并有利于保持心脏功能正常,其防粘连作用可能与HAM分泌IL-10和MMP-9有关。
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