黄瓜单性结实与多胺代谢的关系及多胺调控研究

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为探讨黄瓜((?)ucumis Sativus L.)单性结实与多胺代谢的关系,本文采用对比研究的方法研究了黄瓜单性结实品系EP-6与非单性结实品系ZR-2子房发育与多胺代谢的关系以及内源多胺与核酸、蛋白质等生物大分子的关系;同时开展了外源多胺以及多胺合成抑制剂MGBG对黄瓜子房内源多胺以及果实发育影响的研究,分析了不同处理的子房中可溶性特异蛋白质的变化,初步得到如下结果: EP-6授粉与未授粉处理以及ZR-2授粉处理的子房均能正常发育,而ZR-2未授粉处理的子房则不能正常发育,花后3d呈不同程度的萎蔫化瓜。两品系不同处理的子房均含有spd、spm、put与cad四种游离态多胺,其中spd水平最高,其余依次为put、spm和cad,说明内源spd可能与黄瓜子房(幼果)发育关系最密切。这四种多胺均在开花前1d出现峰值,然后逐渐降低,至花后2d又出现一较小的峰值,前一高峰值的出现可能与黄瓜子房细胞分裂旺盛有关,而后一高峰值则可能与子房发育后期细胞体积增大以及幼胚分化有关。 在子房(幼果)发育过程中,EP-6未授粉处理的子房(幼果)内源spd与spm水平显著高于授粉处理,ZR-2则授粉处理高于未授粉处理,而内源cad与put水平则与spd和spm的表现相反,说明spd与spm可能有利于黄瓜果实的发育,尤其与单性结实品系子房(幼果)的关系发育更密切;cad则可能不利于果实发育,并且因含量甚微,对黄瓜子房的发育贡献不大。此外,黄瓜子房中多胺代谢趋势,尤其spd与spm的代谢与RNA和蛋白质代谢趋势基本一致,均在开花前后达到最高水平,然后逐渐下降,但多胺含量最高峰值先于蛋白质水平,揭示内源多胺可 扬州大学二00三届硕士学位论文能主要是通过调节核酸与蛋白质的合成,加速细胞分裂数目,从而促进黄瓜子房初始阶段发育。 外源多胺sPd与s印(sPd+sPm十put混合液)花前2d处理zR.2未授粉子房,均能显著提高zR~2子房内sPd、sPm与Put水平,促进果长与鲜重的增加,从而刺激子房膨大,并且sPd单独处理的效果要优于ssP处理;花前2d对EP一6未授粉处理子房外源喷施多胺合成抑制剂MGBG则显著降低了其子房内sPd与sPm水平,提高了put水平,抑制了果长与鲜重的增加,子房呈不同程度萎蔫化瓜。 运用SDS一PAGE与考马斯亮染色法研究了两品系不同发育时期以及外源多胺和多胺抑制剂调控后蛋白质组成的变化,结果表明不同处理的子房均存在一些可溶性特异蛋白质的出现与消失。EP-6未授粉处理与授粉处理相比,在子房发育早期出现了分子量为98、87、45KD的三种特异蛋白,并且两种处理的的子房均能正常膨大,说明这三种新蛋白的出现可能是维持黄瓜单性结实的关键蛋白;ZR一2授粉处理的子房开花当天至花后3d,分别出现T 87、80、49、42、41、35、26KD与22KD的几种特异蛋白质,而其未授粉处理的子房(幼果)在整个发育时期均未出现上述特异蛋白,仅于花后2d出现一分子量为40KD特异蛋白质,说明未授粉受精不能引起黄瓜子房中某些新蛋白质的合成,使子房(幼果)不能膨大而逐渐萎蔫。 外源多胺sPd单独处理与ssp混合处理,均能引起非单性结实品系zR一2未授粉子房可溶性蛋白组分的变化。sPd单独处理的子房,相对于对照(授粉处理)而言,开花当天至花后3d,都出现分子量为55KD与39KD的两种新蛋白,发育后期又出现了88KD与82KD两种新蛋白质:而ssP处理的子房,除出现88、82、55、39KD四种与sPd单独处理相同的新蛋白外,还出现了28KD与25KD两种特异蛋白,其中82、55、39、28KD与25KD的特异蛋白在整个子房(幼果)发育初期均 n于杰:黄瓜单性结实与多胺代谢的关系及多胺调控研究存在,而88KD的蛋白则从花后ld始出现,这些特异蛋白质可能有利于维持zR一2未授粉子房的正常膨大即单性结实。 单性结实品系EP-6用MGBG处理子房,在开花当天至花后3d分别出现了47KD与25KD两种特异蛋白质,而对照(授粉处理)子房并花则出现分子量为85KD、soKD、12KD与loKb四种新蛋白;由于外源喷施M邻G后,能显著降低黄瓜单性结实品系子房中内源sPd与sPm两种主要多胺的水平,增加put的水平,推测47KD与25KD两种蛋白质的出现可能不利于黄瓜单性结实。 除上述特异蛋白质外,EP一6与ZR一2不同处理的子房,还存在若干共同蛋白,这些蛋白质在黄瓜两个品系子房整个发育时期均存在,仅在合成速度与水平(浓度)卜存在差异,揭示这些共同蛋白质可能是一些持家基因所编码表达的黄瓜子房形态建成所必须的蛋白质。
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