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β-受体激动剂是与肾上腺素、苯乙醇胺类在化学结构、生理特性相似的一种化学合成物质,此种药物具有增加胴体瘦肉率,降低脂肪含量,增快禽畜生长的作用,这类药物被统称为“瘦肉精”,被广泛应用的3种典型“瘦肉精”分别是克伦特罗(Clenbuterol,CLB)、沙丁胺醇(Salbutamol,SAL)及莱克多巴胺(Ractopamine,RAC)。“瘦肉精”事件层出不穷,美国、日本、中国等诸多国家先后颁布了关于β-受体激动剂禁令条例,但是依旧有诸多不法商家为谋求利益,滥用于畜牧养殖业,导致“瘦肉精”在动物体内残留量过大。据研究表明β-受体激动剂在动物体内代谢尤为复杂,药物的残留超标通过食物链的积累,给人体、环境均带来了不可预估的风险。现阶段,我国针对β-受体激动剂的研究较多,但是关于其残留的代谢产物以及代谢途径甚少,因此,本试验建立高效液相色谱-串联质谱检测方法,对SAL、CLB、RAC在体内的代谢产物、代谢规律进行研究,以便考究在猪肉中的降解情况,并对市面上的猪肉进行采集、快筛,同时建立数据库。具体的研究内容如下:1.采用LC-MS/MS的技术,建立测定3种β-受体激动剂残留的方法。确定了样品前处理方法,并用优化好色谱条件、质谱条件进行上机处理。根据试验得到沙丁胺醇在0.0100~4.000μg/mL的范围内有着良好的线性关系,克伦特罗、莱克多巴胺在0.0050~4.000μg/mL的范围内有着良好的线性关系,相关系数(R~2)均在0.999以上,在0.5、1、1.5μg/mL三个低、中、高不同添加水平下测得猪、羊、鼠组织样品的平均回收率均在85%以上,变异系数均小于10。2.研究3种β-受体激动剂在大鼠体内代谢产物以及代谢规律。按照1.2 mg/kg·bw剂量通过灌胃方式对大鼠给药,在单次给药后3、6、9、12、24 h采集大鼠肝脏、肾脏、肌肉、血样品,并在单次给药后6、12、24、36、48 h对大鼠粪便进行采集。试验结果表明,在体内主要是以原形药物进行存在,并发现少量沙丁胺醇甲基化结合物m/z 254.000[M+H]~+、克伦特罗甲基化结合物m/z 293.000[M+H]~+。3.不同的β-受体激动剂在同一物种不同组织之间残留代谢存在一定的差异。灌胃给药沙丁胺醇后3~24 h,肾脏、肝脏中的浓度先下降后迅速增加,肌肉和血浆中浓度增加、减少趋势均较为缓和,对其峰值浓度进行排序:肾脏>肝脏>血浆>肌肉;灌胃给药克伦特罗后3~24 h,肾脏、肝脏、肌肉先下降后上升,肾脏中峰值浓度最高可达13.12μg/mL,对其峰值浓度大小进行排序为:肾脏>肝脏>肌肉>血浆;给药莱克多巴胺3~24 h,肾脏在3 h的采集点即可达到峰值浓度11.42μg/mL,随后开始下降,对其峰值浓度进行排序为:肾脏>肝脏>肌肉>血浆。4.本试验还用SAL、CLB、RAC的胶体金对各市周边屠宰养殖场以及超市采集的猪肉样品进行快筛处理,建立数据库,得到3种“瘦肉精”的总检出率为26.53%。本研究为畜牧养殖中“瘦肉精”的监管提供技术手段和理论参考,对保障畜牧业产品安全、环境安全,促进我国畜牧业的发展有着重要的意义。