研究目的： 青光眼是以病理性高眼压、进行性视神经变性和视野缺损为特征的，位列全球第二位的不可逆性致盲眼病。我国乃至世界范围用于青光眼治疗的费用以及由此造成的直接经济损失与增加的社会负担是巨大的。因此青光眼的防治研究是眼科学研究的重要领域，是防盲工作及公共卫生工作的重点之一，同时具有非常重要的社会、经济意义。 滤过性手术仍是目前药物无法控制的青光眼的主要治疗手段，但术后二年内的失败率达15％～25％，手术失败的最直接原因就是术后滤过区的组织通过启动自身修复功能，成纤维细胞增殖，导致滤过区纤维瘢痕化。结膜下以及巩膜滤过道瘢痕化是影响术后远期眼压稳定的重要因素。随着一些抗代谢药物，如5-Fu、MMC等的应用，抗青光眼滤过手术的成功率已大大提高，但随之带来一些不可避免的并发症：滤过泡渗漏、低眼压、眼球感染、低压性眼病等等，严重影响了滤过性手术的效果，并进一步加重视功能损害。正确评价及应用滤过术后抗瘢痕形成辅助药物，寻找吸收完全、疗效高、毒副作用小、同时又不影响创口愈合的平衡调控的抗瘢痕形成药物，是提高青光眼滤过术成功率的关键一环。 罗格列酮是噻唑烷二酮类胰岛素增敏剂，是II型糖尿病的首选用药。新近的动物研究发现：罗格列酮能够抑制大鼠肾脏和肝脏的间质纤维化，其高效的抗纤维化效应以及安全性已经在动物试验中得到验证。这些试验表明，罗格列酮能够减少TGFβ1的表达、阻止TFGFβ信号传导、抑制TGFβ1下游效应因子结缔组织生长因子(CTGF)和纤溶酶原激活剂抑制剂-1(PAI-1)的表达，增加抗纤维化抗炎作用的骨形态发生蛋白(BMP-7蛋白)表达等，从而从多层面达到抗纤维化的作用。 基于这些考虑，本课题研究应用罗格列酮抑制人眼Tenon’s囊成纤维细胞(humansTenon’scapsulefibroblasts，HTF)的增殖和移行的效果，探讨其可能的作用机制，并进一步在实验动物模型上研究罗格列酮抑制抗青光眼术后滤过泡的疤痕化、提高青光眼滤过手术的成功率的可行性、有效性。 方法： 1、人眼球筋膜囊成纤维细胞的体外培养和鉴定：取新鲜的Tenon’s囊组织，利用组织块培养法，进行成纤维细胞体外培养，并利用光镜、细胞免疫组织化学染色法鉴定人成纤维细胞； 2、在体外进行成纤维细胞原代及传代培养，分别采用MTT法及划线法，对培养细胞分别加入10，20，50，100，250，300，400，500mg/L的罗格列酮，研究不同浓度的罗格列酮对体外培养的成纤维细胞增殖及移行的影响，并采用ELISA方法检测不同浓度的罗格列酮对细胞TGF—β1的分泌量的影响，采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)，研究不同浓度的罗格列酮对TGF—β1mRNA表达的影响。 3、利用新西兰纯种兔制作青光眼滤过性手术模型，在手术后在术区旁边注射罗格列酮，另眼设为空白对照。观察滤过泡的存活情况，并于术后14d、28d时取标本进行术区组织病理学切片，做HE染色，检测术后各组的胶原纤维增殖和炎症细胞浸润的情况。 结果： 1、体外成功培养人眼球筋膜囊成纤维细胞，细胞呈长梭形，胞浆丰富，核大，生长能力强，呈旋涡样或羽毛样生长，Vimentin染色阳性、角蛋白染色阴性； 2、MTT法结果显示：当浓度在20～500mg/L之间变化时，罗格列酮能明显抑制成纤维细胞的增殖和移行，与对照组比较，差别有统计学意义，且强度呈剂量依赖性； 3、ELISA法检测表明：罗格列酮能明显下调TGF-β1的分泌，与对照组比较，差别有统计学意义； 4、RT-PCR检测结果示：罗格列酮能明显下调TGF-β1mRNA的表达，与对照组比较，差别有统计学意义； 5、在新西兰纯种兔滤过性手术模型中，单纯手术组的滤过泡存活不到2周，而罗格列酮抑制组的滤过泡可以维持近4周；病理组织学检查发现单纯手术组术后可见结膜下组织有较多的炎症细胞和成纤维细胞增殖，伤口愈合较快；而罗格列酮抑制组在术后结膜下组织中炎症细胞和成纤维细胞增生较少，明显比单纯手术组稀疏，巩膜伤口愈合较差，时间较长。 结论： 罗格列酮能明显抑制人Tenon’s囊成纤维细胞(HTFs)的增殖和移行，其作用与其抑制转化生长因子β1的分泌有关；在体内试验中也初步显示出抑制青光眼术后滤过区纤维增生的趋势。