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目的:
1.CT导引下成功建立兔膝骨性关节炎动物模型,选择关节软骨最佳MR成像序列,并做分组对照观察
2.探讨CT导引下O3干预治疗兔膝骨性关节炎,观察实验兔关节软骨部分炎性介质IL-1、TNF-a、MMP-13的表达情况
3.本课题将兔膝关节炎关节软骨MR上微细变化与免疫组化表达相对照,来进一步探讨臭氧对软骨细胞的影响及其机制
方法:
1、建立动物模型
将4%木瓜蛋白酶0.3ml通过关节腔内注射法注入兔膝关节的双后肢,制成兔膝骨性关节炎模型。
2、动物分组
随机抽取6只实验兔作为对照组,通过MR双侧兔膝关节检查,将剩余成功造模后的实验动物随机分为:骨性关节炎组,医用臭氧组,玻璃酸钠组。正常对照组及骨性关节炎组不做任何处理,玻璃酸钠组向双侧膝关节腔内每次每侧注射1%浓度的SH1ml,注射频率为1次/周,连续4周注射;医用臭氧组向双膝关节腔内每次每侧注入浓度为35ug/ml臭氧5ml;注射频率为1次/周,连续4周注射,治疗1周后再次对双侧膝关节行MR检查,完成后一并处死所有实验动物。
3、软骨组织中IL-1、TNF-a及MMP-13的检测
切取实验兔双侧股骨内侧髁关节软骨并修剪成1×1×2mm3小长条,采用DAB法检测关节软骨细胞IL-1、TNF-a及MMP-13的阳性表达。
结果:
1.CT引导下兔膝骨性关节炎动物模型成功建立。
2.臭氧干预治疗兔膝骨性关节炎前后,软骨组织中IL-1、TNF-a及MMP-13的表达存在变化且其变化趋势较一致。
3.IL-1、TNF-a及MMP-13阳性表达率:OA、O3、 SH三组均高于正常对照组(P<0.05),O3组与SH组低于OA组(P<0.05)。O3组与SH组无统计学意义(P>0.05)。
4.MR检查及免疫组化结果显示,实验组兔膝关节腔内注射臭氧或玻璃酸钠,均对关节炎病变有一定抑制作用,两种治疗方法的疗效差异无统计学意义。
结论:
1.臭氧干预治疗兔膝骨性关节炎,能引起软骨组织中IL-1、TNF-a及MMP-13这三种炎性介质表达程度的改变,且其变化趋势与免疫组化结果表达情况较一致。
2.医用臭氧经膝关节腔内注射对骨关节炎动物模型的关节软骨有修复作用,使关节软骨中IL-1、TNF-a、MMP-13表达减少,软骨表面较光整、裂隙生成减少、细胞增生等退变延缓现象,MR上显示各组实验兔关节软骨上存在着信号变化,由此可见IL-1、TNF-a、MMP-13的表达减少与病理及MR上变化的软骨退变好转对应,证明臭氧具有治疗骨关节炎的潜在可能性。