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目的:研究chemerin与代谢综合征(MS)的关系,并初步探讨其作用机制。
方法:1.根据2005年国际糖尿病联盟(IDF)颁布的MS诊断标准将初诊2型糖尿病(T2DM)分为MS组(T2DM合并MS)和NMS组(T2DM不合并MS),每组各30例,另选择正常健康体检者28例作为正常对照组,酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清chemerin浓度,用单因素方差分析比较各组间血清chemerin的水平,并分析其与MS各组分如腰围(WC)、血糖、血压及血脂等的相关性;2.体外研究:(1)在诱导分化成熟的3T3-L1脂肪细胞,用荧光定量PCR方法观察重组chemerin蛋白对促炎因子TNF-α、IL-6、IL-1β、leptin及抗炎因子adiponectinmRNA表达的影响;(2)荧光定量PCR方法观察3T3-L1前脂肪细胞诱导分化过程中chemerinmRNA表达的改变;(3)用油红O染色方法初步观察重组chemerin蛋白对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响,并用荧光定量PCR方法观察chemerin对FAS、PPAR-γ2、C/EBP-αmRNA表达的影响。
结果:1.(1)与正常对照组相比,MS组的体重指数(BMI)、WC、腰臀比(WHR)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、空腹血糖(FPG)、餐后2小时血糖(PPG)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及甘油三酯(TG)均显著增高(P<0.05),而胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)显著下降(P<0.05);(2)MS组血清chemerin水平显著高于NMS组及正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01),而NMS组与正常对照组间chemerin水平差异无统计学意义(P>0.05);(3)简单相关分析显示,血清chemerin水平与BMI、WC、WHR、DBP、FINS、餐后2小时胰岛素(PSI)、HOMA-IR、HOMA-β、TG及血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)呈正相关(P<0.05),与FPG、PPG及HDL-C呈负相关(P<0.05);(4)多元逐步回归分析结果显示,WHR、DBP、HOMA-β及hs-CRP是影响血清chemerin水平的独立相关因素(P<0.05);2.(1)在诱导分化成熟的3T3-L1脂肪细胞,重组chemerin蛋白下调了促炎因子TNF-α、IL-6、IL-1β、leptin基因的表达(p<0.05),上调了抗炎因子adiponectin基因的表达(p<0.05);(2)chemerin基因在3T3-L1前脂肪细胞中低表达,在3T3-L1前脂肪细胞分化成熟过程中,其表达水平显著上调;(3)油红O染色结果显示,100ng/mlchemerin可以促进3T3-L1前脂肪细胞的分化,荧光定量PCR结果显示FAS、PPAR-γ2、C/EBP-α基因表达增加。
结论:1.本研究发现MS组血清chemerin水平显著高于NMS组及正常对照组,血清chemerin水平与MS各组分及hs-CRP存在相关性;2.重组chemerin蛋白抑制分化成熟的3T3-L1脂肪细胞TNF-α、IL-6、IL-1β及leptin基因的表达,促进adiponectin基因的表达;chemerin对3T3-L1前脂肪细胞分化有促进作用。