生姜的组织培养与农杆菌介导遗传转化体系建立的研究

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本论文研究以柳姜1号和鲁大姜两个生姜品种为材料,系统地研究了生姜优良品种的组织快繁及试管姜诱导,建立起良好的培养体系。同时,结合农杆菌介导遗传转化建立起遗传转化体系,成功的获得了生姜GUS基因转化植株,并进行了检测,为今后的生姜组织培养与遗传转化研究提供了重要的参考依据。试验结果表明: 1、柳姜1号茎尖使用0.1%升汞(HgCl2)12min+70%酒精(CH3CH2OH)1min进行灭菌效果最好,污染率为12.1%,分化率达73.5%,平均生成的芽数为2.46个;鲁大姜茎尖使用0.1%升汞(HgCl2)11min+70%酒精(CH3CH2OH)1min进行灭菌效果最好,污染率为15.6%,分化率达79.3%,平均生成的芽数为2.58个。 2、不同基因型材料的诱导分化能力有差异,柳姜1号的诱导分化率为97.5%,平均生成的小芽数为2.55个;鲁大姜的诱导分化率为84.17%,平均生成的小芽数为2.16个。 3、不定芽的直接分化途径可作为生姜组织培养的主要途径;脱分化途径产生的生姜愈伤组织分化频率低,不利于生姜组织培养。 4、芽和茎是生姜组织培养的适宜材料,直接分化不定芽频率高;愈伤组织的诱导分化以芽为外植体的芽分化率相对较高。 5、生姜芽的愈伤组织诱导分化培养基以MS+6-BA1.0mg/L+2,4-D3.0mg/L为最佳。柳姜1号的愈伤组织诱导率、芽分化率、分化芽数分别为:84.6%、88.6%、5.49个;鲁大姜为:89.7%、90.4%和4.85个。 6、柳姜1号茎尖和芽诱导分化的最佳培养基为:MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L,芽分化率均为100%,平均分化芽数分别为5.26个和5.02个;鲁大姜的诱导分化培养基以MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.3mg/L为最佳,芽分化率均达100%,平均分化芽数分别为5.99个、5.87个。 7、生姜组织培养的芽增殖以MS为基本培养基的培养效果最好。
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