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目的:自人胰腺癌细胞系SW1990中分选出SP细胞(side population cells)亚群,并对SP细胞的基本生物学特性进行研究。
方法:采用荧光激活细胞分选法(fluorescence—activated cell sorting FACS),分选人胰腺癌细胞系SW1990中的SP细胞亚群;并采用ATP生物荧光体外药敏技术、细胞有限稀释法和Transwell法分别检测SP细胞和非SP细胞对化疗药物的敏感性、克隆形成能力以及体外侵袭和迁移能力;同时使用流式细胞仪分析两个细胞亚群的细胞周期差异;体外培养18天后,采用Hoechst33342染色法分析两个细胞亚群的分化能力;研究SP细胞和非SP细胞在NOD/SCID小鼠体内致瘤性的差异;研究维拉帕米是否能逆转SP细胞对不同抗肿瘤药物的抗性。
结果:在人胰腺癌细胞系SW1990中成功分选SP细胞,其比例为3.92%;抗肿瘤药物对SP细胞的抑制率低于非SP细胞(P<0.05);SP细胞的克隆形成能力高于非SP细胞,分别为19.79%~28.12%和6.25%~10.41%(P=0.04);SP细胞的侵袭和迁移能力也明显高于非SP细胞(P<0.05);SP细胞和非SP细胞的G0/G1期细胞比例分别为63.56%±1.13%和58.46%±0.96%(P<0.05);细胞分化实验结果表明,两个亚群中SP细胞比例分别为1.02%±0.04和0.06%±0.02%(P<0.05);SP细胞体内成瘤性强于非SP细胞,成瘤率分别为66.67%和11.11%。
结论:人胰腺癌细胞系SW1990中存在一定比例的SP细胞,对其基本生物学特性的研究,结果表明此SP细胞具有肿瘤干细胞特征,是肿瘤干细胞富集的亚群。耐药性研究结果表明,SP细胞和非SP细胞相比对化疗药物表现出一定的耐药性;与维拉帕米联合作用后,可以提高化疗药物对SP细胞和非SP细胞的杀伤功能,其中SP细胞改变尤为显著。