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目的:观察高铁环境(枸橼酸铁铵)对人成骨细胞铁稳态、氧化应激的影响,探讨两者之间的相互关系。方法:人成骨细胞(hFOB1.19)培养后,用不同浓度枸橼酸铁铵(0umol/L、50umol/L、100umol/L、200umol/L)加入细胞培养基中,用RT-PCR检测成骨细胞铁调节基因膜转铁蛋白(FPN1)、转铁蛋白受体(TfR)和二价金属转运蛋白1(DMT1)的表达变化;激光共聚焦扫描显微镜(CLSM)观察成骨细胞内的铁离子荧光强度;分别用丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)试剂盒检测成骨细胞MDA含量及SOD、GSH-PX活性;流式细胞仪检测成骨细胞内活性氧(ROS)水平。结果:在FAC干预48h后,与对照组相比,FPN1mRNA的表达随FAC干预浓度增加呈剂量依赖性上调,TfR、DMT1mRNA的表达呈剂量依赖性下调(P<0.05);FAC干预48h后成骨细胞内铁离子荧光强度剂量依赖性减弱,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);FAC干预48h后,成骨细胞脂质过氧化物MDA水平呈剂量依赖性升高,成骨细胞抗氧化物酶SOD及GSH-PX活性呈剂量依赖性降低,成骨细胞ROS水平随FAC干预浓度增加呈剂量依赖性升高(P<0.05);结论:成骨细胞的铁通道蛋白受环境铁离子影响,在一定范围内随着细胞外铁离子浓度增加,成骨细胞铁调节基因发生特异性改变,从而导致细胞内铁离子浓度升高;随着细胞内铁离子浓度的增加,细胞内氧化应激水平也随着相应升高。目的:了解高铁环境(枸橼酸铁铵)对人成骨细胞氧化应激指标(活性氧)、成骨细胞生物活性指标变化,探讨活性氧在“铁过载与骨代谢”之间的作用。方法:体外培养成骨细胞,一组运用200umol/L枸橼酸铁铵(FAC)干预(表示:铁过载),一组运用2.5mmol/L N-乙酰半胱氨酸(NAC,抗氧化剂)干预(表示:抗氧化),一组NAC预处理1h后运用相同浓度FAC干预(表示:抗氧化对铁过载的作用),一组为正常对照;细胞培养48h后,流式细胞仪检测各组细胞内活性氧(ROS)的水平;CCK-8法检测各组成骨细胞活力情况;半定量RT-PCR法检测各组细胞OPG、BGP和COL1mRNA表达的变化;碱性磷酸酶活性试剂盒检测各组细胞碱性磷酸酶活性。结果:不同干预组成骨细胞内活性氧含量差异显著不同(P<0.05),FAC组显著高于对照组,FAC+NAC组低于FAC组、高于NAC组;各组间活性氧含量的变化与成骨细胞活力、OPG、BGP和COL1mRNA表达光密度比值、碱性磷酸酶活性呈负相关性,组间比较有统计学差异(P<0.05)。结论:铁过载可以降低成骨细胞生物活性,铁过载可能促进细胞活性氧水平增加,铁过载环境下抗氧化剂可以降低活性氧水平、提高细胞生物活性;铁过载降低成骨细胞生物活性可能与铁过载增加成骨细胞内活性氧水平有关。