【摘 要】
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本工作研制出一种新型的通过氢键作用于DNA碱基对以达到复合DNA目的非病毒载体。以自由基无规聚合的方式制备了聚乙烯二氨基三嗪(PVDT)及其与乙烯基吡咯烷酮(VP)的共聚物,并
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本工作研制出一种新型的通过氢键作用于DNA碱基对以达到复合DNA目的非病毒载体。以自由基无规聚合的方式制备了聚乙烯二氨基三嗪(PVDT)及其与乙烯基吡咯烷酮(VP)的共聚物,并精制出水溶部分。琼脂糖凝胶电泳显示PVDT基聚合物可有效复合DNA,并通过氢键作用使DNA缩合成密实状态,有效置换溴化乙锭(EB)。随着DNA的复合,圆二色谱(CD)发现DNA构象由B型向C型转变,并出现psi型谱线,可能缘于DNA高级结构的改变(长程手性结构)。透射电镜(TEM)下,被PVDT基聚合物缩合的DNA呈现球状、环状或大的聚集体,类似于阳离子载体缩合DNA的形态。以荧光素酶和增强的绿色荧光蛋白报告基因研究PVDT基载体对非洲猴肾(COS-1)细胞的转染,结果表明PVDT基载体具有满意的转染效率,比商品化ExGen 500有着更高的转染活性和更低的细胞毒性。PVDT基载体可有效保护DNA免受DNase I的酶解,复合物在牛血清蛋白(BSA)下仍具有高的稳定性。鉴于这些特点,PVDT基载体优于传统阳离子载体,并有望用于体内转基因应用中。
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