转cry1C基因水稻感染RDV后对非靶标害虫褐飞虱生物学特性的影响及其代谢物质分析

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随着世界人口的不断增加,粮食问题显得愈发重要,但是病虫草害严重影响作物的产量和质量。近年来,随着转基因技术的发展,一些抗虫、抗病、抗除草剂的转基因水稻得以培育,在很大程度上为有效控制病虫草害提供了重要的种质资源储备。但是转基因水稻可能带来的问题也受到了公众的关注,目前已有大量关于转基因对稻米和田间生态系统影响的研究,但是在逆境条件下转基因水稻安全性的报道比较少。本文研究了转cry1C基因水稻在感染水稻矮缩病毒(Ricedwarf virus,RDV)的条件下,对褐飞虱发育、繁殖、取食和产卵选择性等生物学特性的影响,并通过气相色谱—飞行时间质谱联用仪(Gas chromatography-time of flight-mass spectrometry,GC-TOF-MS)对水稻叶片代谢物质进行了代谢组学分析,明确其代谢物质的变化,以评价在逆境条件下Bt水稻的生态安全性,为转基因水稻能否商业化及推广提供科学依据。主要结果如下:  1、转cry1C基因水稻感染RDV后对褐飞虱取食和产卵选择性的影响  通过观察室内条件下褐飞虱在不同水稻处理上的着虫数与产卵量,得知褐飞虱对转cry1C基因水稻与非转基因水稻、感染RDV水稻与健康水稻材料在取食和产卵选择上均无明显偏向性。  2、转cry1C基因水稻感染RDV后对褐飞虱生物学特性的影响  水稻类型(Bt vs non-Bt)对褐飞虱的卵历期、除3龄若虫期外的各若虫期及雌雄若虫总历期有显著影响。褐飞虱取食Bt水稻T1C-19后,2龄、4龄、5龄若虫期和雌雄若虫总历期较取食亲本MH63的均显著延长。取食感染RDV的T1C-19较感染RDV的MH63的卵历期、3龄若虫期显著延长,但1龄若虫期显著缩短。  RDV病毒(RDV vs non-RDV)对褐飞虱5龄若虫期和雄若虫总历期有显著影响。褐飞虱取食感染RDV的MH63水稻后:卵历期和3龄若虫期显著缩短,4龄、5龄若虫期和雄若虫总历期显著延长。取食感染RDV的T1C-19水稻后:只有卵历期显著延长,其他参数无显著变化。  水稻类型和感染RDV病毒对褐飞虱的若虫存活率、雌雄成虫寿命、产卵量和卵孵化率等生命表参数均没有显著影响。  转cry1C基因水稻感染RDV后对褐飞虱种群的内禀增长率(rm)、净生殖率(R0)、世代平均历期(T)、种群加倍时间(DT)、周线增长率(λ)5个种群参数都没有显著性的影响。  3、转cry1C基因水稻感染RDV后水稻的代谢物质分析  通过GC-TOF-MS对水稻叶片代谢组学的分析,共得到920个有效质谱峰,其中374种物质被鉴定出来。多元统计分析表明:T1C-19和MH63之间有9种差异化合物,MH63-RDV和T1C-19-RDV之间有42种差异化合物,MH63-RDV和MH63之间有18种差异化合物,T1C-19-RDV和T1C-19之间有57种差异化合物。  通过分析差异化合物所参与的代谢通路,发现多个氨基酸代谢途径受到影响。进一步测定水稻体内游离氨基酸的含量,结果表明:转Bt基因对于水稻体内氨基酸的含量没有显著影响,但是感染RDV显著提高了11种游离氨基酸(Thr、Ser、Ala、 Cys、Val、Ile、Leu、Phe、g-ABA、 Lys、Arg)的含量。  通过收集和测定水稻挥发物,共鉴定出18种挥发物。转Bt基因对于所有挥发物的含量均没有显著的影响,但感染RDV对2-heptanol(2-庚醇)和(E)-β-caryophyllene(β-石竹烯)产生了显著影响,两种差异化合物在感染RDV水稻中高于健康水稻。代谢物质分析结果表明转cry1C基因对于水稻的代谢组学和挥发物含量影响不大,相对于转cry1C基因,感染RDV对于水稻代谢物质有更显著的影响。
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