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目前发现,生物体中的ATP-柠檬酸裂解酶(ACL)发挥着重要作用,其具有以下四大主要功能:(1)生成胞间乙酰-辅酶A;(2)作为脂肪酸合成的调控酶;(3)提高植物抗逆性;(4)参与了有性生殖的调节。但与甘蔗ACL相关的基因功能研究在国内外尚未见报道。本研究利用分子生物学技术,研究了soACLA-1基因功能。主要结果如下:1.克隆SOACLA-1基因。根据甘蔗soACLA-1基因(登录号为JQ292843.1)的序列,在ORF的两端设计特异引物,通过PCR技术,克隆了甘蔗SoACLA-1基因编码区全长1272bp的cDNA片段。2.构建双元植物表达载体。将克隆的cDNA片段正向插入PRI101-AN双子叶植物表达载体,命名为SoACLA-1-PRI101-AN;将克隆好的cDNA片段反方向插入PRI101-ON单子叶植物表达载体,命名为SoACLA-1-PRI101-ON.3.获得转基因烟草和转基因甘蔗。采用农杆菌介导的遗传转化法分别将SoACLA-1-PRI101-AN转化烟草(Nicotiana tbacum L. cv. K346),将SoACLA-1-PRI101-ON转化甘蔗品种新台糖22号(ROC22)。通过PCR.Southern杂交检测,获得了44株转基因烟草和21株转基因甘蔗。4.Real-time RT-PCR表明,转基因烟草SoACLA-1基因的表达量显著高于野生型植株,随着干旱胁迫的增加,该基因表达量呈抛物线状态增长;中度干旱胁迫下生长的转基因烟草和野生型的烟草相比,SOD、POD和CAT活性有不同程度的增加,其中SOD活性和CAT活性存在极显著差异;随着干旱胁迫的加强,转基因烟草和野生型的烟草相比叶片出现萎焉时间晚4-5天。研究表明,过量表达甘蔗SoACIA-1提高了烟草的抗旱能力。