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研究目的:我们前期研究发现,不明原因复发性流产(Unexplained Recurrent Spontaneous Abortion,URSA)患者外周血及蜕膜组织中Th17细胞及其相关细胞因子白介素-17(IL-17)、IL-23水平明显高于正常妊娠者。IL-17/IL-23作为经典的炎症轴,已被证实在自身免疫性疾病的病理过程中发挥重要的作用,从而成为相关免疫性疾病治疗的新靶点,而URSA被认为与母胎免疫失衡有关。强的松用于治疗反复胚胎移植失败和复发性流产取得一定疗效,但并未得到广泛认可。本研究以小鼠脾淋巴细胞为实验对象,通过体外细胞培养的方法,利用细胞因子TGF-β1、IL-6、IL-23刺激淋巴细胞向Th17方向分化,诱导母胎免疫排斥反应的细胞模型,观察强的松对IL-17分泌的影响以及对IL-23/IL-17炎症轴的调节作用,探讨强的松治疗治疗反复胚胎移植失败和复发性流产可能的作用机制,为强的松治疗妊娠失败提供基础理论依据。研究方法:取昆明小鼠,分离脾脏淋巴细胞制成单细胞悬液,并以抗CD3抗体,抗CD28抗体刺激其体外增殖,MTT法检测不同浓度强的松对小鼠脾淋巴细胞增殖功能的影响。另取小鼠脾淋巴细胞分4组,对照组A组用空白培养液、B组用最佳稀释浓度的强的松含药培养液培养,两组细胞培养24h后,换含有TGF-β1、IL-6、IL-23的培养液继续培养48h;C、D组淋巴细胞培养体系中,先用含TGF-β1、IL-6、IL-23培养液培养48h后,C组改用最佳稀释浓度含药培养液,D组改用空白培养液继续培养24h。分别收集不同处理组细胞培养上清液,ELISA检测上清液中IL-17的含量;收集细胞采用Real-Time PCR检测IL-17m RNA、IL-23m RNA的表达水平。研究结果:在0.001μM强的松低浓度下,对小鼠脾淋巴细胞的增殖即出现抑制作用,并与浓度存在一定量效关系。浓度为在0.01-10μM时,对淋巴细胞增殖的抑制作用无差异(P>0.05),当浓度高于100μM时,淋巴细胞增殖受到明显抑制,并且随着浓度增大,抑制作用更加明显。ELISA检测显示,B组IL-17含量低于其他3组(P<0.01),C组IL-17含量低于A组,D组(P<0.01)。B组IL-17m RNA表达量低于A组降低(P<0.05),A、B两组IL-23m RNA表达量比较,差异无统计学差异意义;C组IL-17m RNA、IL-23m RNA表达量低于D组(P<0.05)。研究结论:强的松能够抑制淋巴细胞的增殖,当机体免疫系统失衡促炎因子高表达时,强的松能够抑制IL-17分泌,下调IL-17、IL-23促炎因子基因的表达水平,减弱免疫排斥反应,可能是其治疗相关免疫性疾病的作用机制之一,该结果为强的松治疗由IL-23/IL-17介导的母胎免疫炎症反应提供了一定的理论依据。