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目的：研究再生家蚕丝素蛋白对T、B淋巴细胞影响作用及其在创面的降解速率。方法：1、可溶性再生家蚕丝素蛋白体内外对淋巴细胞的激发作用1.1再生家蚕丝素蛋白体外对T淋巴细胞的激发作用将可溶性膜状再生家蚕丝素蛋白以RPMI1640配制成的丝素蛋白溶液,分别和人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell, PBMC)以及大鼠淋巴结细胞悬液进行共培养,调整丝素蛋白溶液终浓度为0.01%和0.1%,72h后观察其活化状态,并采用MTT试验检测增殖情况。1.2再生家蚕丝素蛋白体内对B淋巴细胞的激发作用将可溶性再生家蚕丝素蛋白与福氏佐剂进行乳化后免疫新西兰家兔,抗原用量为15mg/kg体重,加强免疫4-5次后,采用免疫双扩散法检测免疫血清中特异性抗体,紫外分光光度法检测血清中球蛋白。2、不可溶性再生家蚕多孔丝素膜在体内的降解速率和对免疫细胞的影响作用2.1再生家蚕多孔丝素膜在体内的降解速率研究用125I标记再生家蚕多孔丝素膜,检测标记率和标记稳定性。在SD大鼠背部切除皮肤建立创面,125I-再生多孔丝素膜覆在创伤面,再将切除皮肤的表皮覆于再生多孔丝素膜上进行缝合。在术后不同时间点采用单光子发射计算机断层成像术(Single-Photon Emission Computed Tomography, SPECT)进行显像,并用ROI(Region of interest)技术进行分析。示踪至同位素信号消失,处死大鼠取各个脏器进行体内分布检测。2.2再生家蚕多孔丝素膜在创面对免疫细胞的影响大鼠处死后,取创面皮肤经HE染色后对其中的炎症细胞进行分析。术后3d、14d、28d、56d取抗凝血分离PBMC并在55d取脾脏细胞经双色免疫荧光及流式细胞术(flow cytometry, FCM)检测CD3+CD25+T/CD3+T细胞的比率。结果：1、可溶性再生家蚕丝素蛋白材料对T、B淋巴细胞的激发作用1.1再生家蚕丝素蛋白体外对T淋巴细胞的激发作用两种浓度再生家蚕丝素蛋白溶液刺激PBMC后MTT试验OD值和阴性对照一致,和阳性对照有显著性差异。大鼠淋巴结细胞的刺激结果和上述一致。1.2再生家蚕丝素蛋白体内对B淋巴细胞的激发作用可溶性再生家蚕丝素蛋白的免疫血清在免疫双扩散试验中未出现阳性沉淀线,而阳性对照则出现了相应的沉淀线。两种物理状态的丝素蛋白免疫血清中的球蛋白含量和阴性对照一致,和阳性对照有显著性差异。2、再生家蚕丝素膜在创面的降解和对T细胞的影响作用2.1同位素示踪法研究再生家蚕多孔丝素膜在创面的降解速率125I标记再生多孔丝素膜的标记率为(21.1±1.11)%,标记后稳定性较好。术后植入原位的同位素信号强度随时间延长逐渐降低,至55天时同位素信号基本消失,ROI分析残留率随时间延长也逐渐降低,至55d时为(3.39±2.59)%。体内分布试验各个器官的放射性活度均较低,相比较而言,肾脏分布较高,其%ID/g为0.29±0.06。淋巴器官分布均较低。2.2再生家蚕多孔丝素膜在创面对免疫细胞的影响植入原位组织经HE染色后观察到少量的丝素成分,其比例和ROI结果较为一致。炎症反应较弱。再生多孔丝素膜植入后3 d, PBMC中CD3+CD25+/CD3+T细胞比率高于正常。14d时和正常一致,28d和55d时低于正常。术后55d,脾脏中CD3+CD25+/CD3+T细胞的比率为和正常组两者无差异(P>0.05)。结论：再生家蚕丝素蛋白激发淋巴细胞的能力较弱,其在体内的降解速率和组织修复速率相协调。