白色念珠菌形态转变相关基因克隆及功能研究

来源 :中国科学院上海生物化学研究所 中国科学院上海生物化学和细胞生物学研究所 中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:j19871010
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白色念珠菌是一种人体机会性致病菌.它具有三种生长形态:菌体,菌丝和假菌丝, 多种外界因素影响其形态发生和毒性表现,其菌丝状态的致病能力更强.该实验利用差别杂交的方法,分离菌丝状态下专一表达的基因.物理图谱分析和核苷酸序列分析表明菌体形态下表达的CX1 cDNA片段编码细胞色素P450 L1A1(羊毛甾醇14α-脱甲基酶,Lanostero 14α-demethylase),Northern杂交分析证明该基因的表达是菌体形态专一的,血清对其表达有抑制作用.菌丝形态专一的CX2 cDNA片段,编码产物包含一个串联重复序列,与白色念珠菌ALS1的重复序列高度同源.Northern杂交分析表明,在菌丝形态下生长的白色念珠菌中其表达量很高,而在菌体形态下生长的白色念珠菌中则不表达.利用CX2 0.5Kb探针,研究者研究 了在不同白色念珠菌菌株中CX2串联重复序列的分布,发现白色念珠菌中都含有这个重复序 列.为研究ALS基因家族在白色念珠菌形态变化中的作用,用同源重组的方法构建缺失ALS1 基因的缺陷株,得到als1/ALS1缺陷株,在固体诱导培养条件下,als1/ALS1缺失株形成菌丝的能力下降.白色念珠的形态转变受多条信号传导途径的影响.研究者以几种白色念珠菌MAPK途径成员的基因缺失株,efg1缺失株为对象,研究几种菌丝专一基因的表达调控情况.用系统感染小鼠模型分析这些突变株的致病能力,同它们形成菌丝的能力相一致,野生菌致的致病能力最强,形成菌丝弱的突变株致病能力也减弱,不能形成菌丝的cph1 efg1突变株和crk1则无毒性.
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