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肿瘤转移是最主要的实体肿瘤致死原因。转移是一个多环节的过程：肿瘤细胞对其周围组织侵袭；穿过血管/淋巴管壁进入循环系统；通过循环到达远端并在此穿出管壁在远端组织形成转移灶；转移灶生长最终形成转移结节。目前对于转移的详细机制尚不完全清楚。死亡受体结构域(Death effector domains, DEDs)是蛋白发生相互作用的区域,含有DED的蛋白可以介导由死亡受体触发的程序性细胞死亡或凋亡。DED本身没有酶活性而是作为其他DEDs的结合区域,因而促进蛋白复合体形成。FADD、caspase8以及DEDD均属于含有DED结构域的蛋白。研究表明,DEDD通过活化caspase3或capase6在CD95介导的凋亡途径中发挥重要作用。近来发现DEDD也参与细胞周期调控并抑制有丝分裂进程。我们最近研究发现DEDD与核因子smad3相互作用,抑制后者的生物学功能。然而,DEDD在肿瘤生长、侵袭和转移中的具体作用尚不清楚。目的：以乳腺癌为研究对象,研究DEDD在肿瘤生长、侵袭和转移过程中所发挥的生物学作用,并阐明DEDD在肿瘤生长、侵袭和转移中的作用机制。方法：免疫组化检测人乳腺癌和结肠癌病理标本中DEDD的表达水平；Western blot检测不同恶性程度人乳腺癌细胞株中DEDD的表达水平；构建pcDNA3.1-DEDD表达质粒,构建pSliencer-DEDDshRNA干扰质粒；在低转移的MCF7细胞株中转染pSliencer-DEDDshRNA,潮霉素筛选稳定表达DEDD-shRNA的干扰细胞株,在高转移的MDA-MA-231细胞株中转染pcDNA3.1-DEDD,G418筛选稳定表达DEDD的过表达细胞株；tran swell检测细胞的迁移和侵袭能力；Western blot和confocal检测EMT相关指标E-cadherin, β-catenin, Vimentin,a-SMA变化情况。Western blot检测EMT调节因子Snail,Twist等的变化,蛋白降解实验检测Snail,Twist降解等。结果：本研究发现,在人乳腺癌和结肠癌病理标本中,DEDD表达水平与肿瘤的不良预后呈负相关。检测不同恶性程度的人乳腺癌细胞株,及其他组织肿瘤细胞株中DEDD的表达水平发现,DEDD与肿瘤细胞株的恶性程度呈负相关。体外和体内实验结果表明,干扰MCF7细胞株中DEDD的表达之后,其生长、迁移、侵袭和转移能力大大增加；相应的在MDA-MB-231中过表达DEDD之后,可以显著抑制其生长、迁移、侵袭和转移能力。干扰DEDD之后,可诱导MCF7细胞发生上皮间叶转化(EMT),下调上皮样标志E-cadherin和β-catenin的表达,同时上调间叶样标志Vimentin和a-SMA的表达；相应的在稳定表达DEDD的MDA-MB-231中,其上皮间叶转化(EMT)进程发生逆转,E-cadherin和β-catenin的表达上调,而Vimentin和a-SMA则显著下调。干扰DEDD可诱导EMT相关转录因子Snail,Twist和Slug的表达,而过表达DEDD使得上述转录因子表达降低。通过报告基因检测和蛋白降解实验发现,DEDD对Snail,Twist的调节主要发生在降解水平。免疫荧光实验发现Snail与LC3存在共定位,说明其可通过自噬途径进行降解,抑制自噬可抑制Snail的降解。免疫共沉淀实验发现DEDD可以与自噬调节因子P13KⅢ/Beclinl复合物相互作用,并维持后者的稳定性,进而维持自噬的活性。最后在干扰DEDD的MCF7细胞中过表达PI3K Ⅲ/Beclinl可以降低Snail,Twist的表达。结论：DEDD的表达与肿瘤的恶性程度呈负相关,并可作为评价乳腺癌和结肠癌肿瘤预后的参考指标。DEDD可抑制乳腺癌的生长、迁移、侵袭和转移。DEDD通过与P13KⅢ/Beclinl自噬复合物相互作用维持后者的稳定性,并激活自噬-溶酶体降解系统对EMT相关转录因子Snail等的降解作用,从而抑制EMT进程,进一步抑制肿瘤的侵袭和转移。