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海草是一种在全球温带和热带地区广泛分布的海洋被子植物,海草床与红树林、珊瑚礁生态系统并称为三大典型海洋生态系统。川蔓草(Ruppia spp.)是一种广泛分布于热带和温带滨海、瀉湖、盐沼地等浅水水域中的海草,承担着栖息地构建与水体-沉积物环境调节等重要生态功能。近年来,随着全球气候变化与人类活动影响加剧,包括川蔓草在内的众多海草在世界范围内正已惊人速度衰退。本研究调查了我国温带地区川蔓草属分布现状;探究了不同生活史类型中国川蔓草种群形成条件及其与底质环境的相互作用;比较了两类种群在干燥胁迫下的种群稳定性;对中国川蔓草种子萌发、建苗与保存条件进行系统研究;评估了中国川蔓草对重金属Cu与Cd污染的耐受能力及其毒性效应。1.我国温带地区川蔓草属分布现状调查本研究调查了我国辽宁省至浙江省7个省(直辖市)沿海地区川蔓草属的分布现状,总结发现海水养殖池、咸水沟渠、盐场沟渠、湿地公园、瀉湖、潮间带是其主要的分布环境生境类型,其中海水养殖池是温带地区川蔓草属分布最常见生境类型。通过重访发现,部分文献中记录的川蔓草种群已消失,综合分析文献记录及实地调查信息后认为,人类活动干扰是影响川蔓草分布的主要原因。2.黄河三角洲中国川蔓草种群特征对中国川蔓草而言,上覆水季节变化可导致种群表现为一年生或多年生生活史特征。本研究调查了黄河三角洲两处不同生活史类型的中国川蔓草种群的生态特征及其对沉积物性质的影响。通过调查其生长旺盛季节的生物量和各季节种子库规模,评估种群状态。通过测定中国川蔓草床沉积物营养元素组成及硫化物含量了解草床植被和沉积物之间的相互作用关系。研究结果表明,相邻地理种群,一年生中国川蔓草种群较多年生种群拥有更大的生物量与种子库规模;中国川蔓草植株对栖息地沉积物总氮含量与有机物组成特征有显著影响;一年生的中国川蔓草种群经历干燥、重新覆水后恢复力显著强于同种情况下的多年生种群。本研究还调查了干燥对中国川蔓草床沉积物、种子库及其种群补充的影响。本次调查的中国川蔓草床表层沉积物会不定期遭遇长期干涸暴露影响。研究结果显示,经历2017年12月至2018年4月长达5个月的干燥后,该中国川蔓草床再次被水层覆盖,而后种子迅速萌发,2018年5月幼苗密度达到1360.86±330.66苗/m2,规模与2017年3月只经历3个月干燥暴露时的情况相似。由此认为,干燥胁迫会显著地延迟中国川蔓草自然种群中种子的萌发与建苗。与大多数海草不同,中国川蔓草种子对栖息地干燥有相当强的耐受与适应能力,表层沉积物中的种子经历近5个月的干燥暴露后依然具有活力。本部分研究为干燥环境下中国川蔓草的抵抗力和稳定性提供了新的认知,并对川蔓草属种群特征进行补充。3环境因素对中国川蔓草种子萌发影响本研究调查了温度与盐度对采自北方沿海地区的中国川蔓草种子萌发与建苗的影响。本研究共进行了0–50 psu范围内7个盐度与0-30℃范围内6个海水温度对中国川蔓草种子萌发影响的实验,确定了适宜中国川蔓草种子萌发和幼苗生长的环境条件。研究发现:(1)种子最佳萌发条件为盐度5 psu、温度30℃;(2)高盐度(40-50 psu)与低温度(0℃)会显著阻碍种子萌发,但当其转移至适宜萌发条件后,其萌发率升高;(3)在盐度适宜时(5-10 psu),随着温度升高,中国川蔓草种子萌发率存在明显的双峰分布;(4)将高盐度或低温度条件下储存的种子转移至适宜萌发条件下后,其萌发率显著升高;(5)温度能够显著的影响中国川蔓草建苗过程,而盐度对建苗过程的影响不显著。本部分研究可为中国川蔓草种群保护恢复提供基础信息。4中国川蔓草种子长期保存方法川蔓草属的种子是进行大规模的沉水植物修复的理想材料,在其繁殖季收集成熟的种子,并保存至人工种子库,可以提高新生的川蔓草种子利用效率,为后续川蔓草床修复提供充分的原料。一定的低温、高盐及干燥条件均能有效地抑制川蔓草种子萌发。该部分实验尝试利用不同的温度、盐度和干燥条件对中国川蔓草种子进行长期保存。实验结果表明:0℃/30-40 psu盐度的湿法保存是中国川蔓草种子长期保存的最佳保存方法。而5℃/相对湿度为33±10%的干燥保存法虽会一定程度降低中国川蔓草种子活力,但也是一种可行的种子长期保存方法。以上结果为建立中国川蔓草人工种子库提供相应基础知识。5中国川蔓草对重金属Cu和Cd污染耐受及毒性响应川蔓草不仅能适应较宽范围盐度环境,也能耐受水环境中较高的重金属浓度,故认为其具有较高的生物修复潜力。然而,川蔓草在生活史早期阶段对重金属暴露的耐受能力还有待研究。本研究调查了中国川蔓草在三个生活史早期阶段对重金属Cu和Cd的吸收能力,并分别从个体水平、亚细胞水平与转录组水平观察相关毒性效应。研究表明,中国川蔓草的幼苗阶段最为脆弱;当Cu和Cd的胁迫浓度分别达到50μM、500μM时,中国川蔓草幼苗出现明显的毒性响应;两种重金属元素进入细胞后,迅速积累在细胞液泡和细胞质组织中,降低其对植物细胞的毒性作用。经4天Cu和Cd暴露后,中国川蔓草植株中与信号识别与蛋白质加工有关的基因表达显著下调。本研究初步探究了中国川蔓草生活史早期对重金属元素Cu和Cd的耐受能力、富集途径与毒性响应,评估了其作为咸水环境重金属污染修复工具物种的应用潜力。