大蒜紫斑病病菌生物学特性及粗毒素培养条件研究

来源 :西北农林科技大学 西北农林科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:iuonake5
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近几年来,国内外已经建立起一种利用致病毒素或毒素类似物结合组织培养技术离体筛选抗病突变体的新方法。本实验旨在通过研究大蒜紫斑病病菌的生物学特性及其病原菌产生粗毒素的条件,为以后利用大蒜紫斑病病原菌粗毒素,筛选具稳定遗传性的大蒜抗紫斑病细胞变异系奠定基础。试验从田间具有典型病斑的发病大蒜叶片上分离病菌并鉴定培养,形态和致病性鉴定结果表明,分生孢子梗直或向一侧略弯曲,褐色,分生孢子常单生或簇生,倒棍棒状、长椭圆形,具横膜5~15个,纵隔膜1~6个,喙部(嘴胞)直或弯曲,具隔膜0~7个。与Alternaria属相关的文献资料对照,将其鉴定为Alternaria porri (Elliott) Cif(葱链格孢)。生物学测定结果表明,供试的5种培养基:胡萝卜葱汁蔗糖培养基、马铃薯葡萄糖琼脂培养基、马铃薯胡萝卜蔗糖琼脂培养基、马铃薯葱汁琼脂培养基、胡萝卜蔗糖琼脂培养基中,病菌在马铃薯葱汁琼脂培养基上生长速率最快,产孢量也最多;菌丝生长的适宜温度范围为22~30℃,低于18℃或者高于37℃均不适宜生长,菌丝培养的最适温度为26℃;病菌产孢的适宜温度范围为20~26℃,产孢培养的最适温度为22℃。菌丝在光暗交替条件下生长最快,在连续黑暗条件下产孢最多;在pH值5~12范围内均能生长和产孢,以pH 8产孢最多。针对大蒜体细胞抗病变异筛选育种中需要的病菌毒素,实验研究了产生粗毒素的培养条件。结果表明,在试验设计的4种产毒培养基:改良Fries培养基、PSK培养基、查彼克培养基、改良理查德培养基中,产毒能力最强的培养基为改良Fries培养基,培养温度为26℃,适宜pH值为7,适宜培养时间为6 h,培养方式为连续24 h黑暗及振荡培养。选择山东章丘大葱种子,以种子萌发抑制法对粗毒素进行生物检测,表明培养得到的粗毒素具有一定的毒性。
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