多种植物提取物的抑菌活性研究

来源 :安徽农业大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:bat_wing
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植物病害是影响农业生产产量的重要灾害之一,然而防治植物病害而过度使用化学农药所带来的环境问题、农药残留以及抗药性等问题也更加突出,植物源农药为解决这一困难提供了很好的途径。本文主要利用高通量快速筛选方法,通过刃天青显色-微量稀释法,测定了26种植物提取物的抑菌活性;对活性较好的植物提取物进一步测定活性,确定了糙叶树乙酸乙酯相提取物具有很好的抑制真菌和细菌的生物活性;对糙叶树乙酸乙酯相粗提物细馏份进行抑菌活性的追踪;对糙叶树正丁醇相粗提物进行分离制备并检测,主要研究结果如下:1.采用乙醇水溶液常温浸提的方法,对26种植物材料进行处理,并按照极性由低到高的有机溶剂进行液液萃取,得到若干不同极性提取物。采用刃天青显色-微量稀释法,测定乙酸乙酯相和正丁醇相提取物对两种常见细菌的抑制活性。结果表明:紫楠乙酸乙酯相、乌桕乙酸乙酯相、黄蒲鸡竹乙酸乙酯相、唐竹乙酸乙酯相、盐肤木乙酸乙酯相和糙叶树乙酸乙酯相提取物抑制金黄色葡萄球菌测定MIC值分别为12.5μg/m L、12.5μg/m L、25.0μg/m L、25.0μg/m L、25.0μg/m L和25.0μg/m L;紫楠乙酸乙酯相、乌桕乙酸乙酯相、迷迭香乙醇提取物、斑苦竹乙酸乙酯相、唐竹乙酸乙酯相、黄蒲鸡竹乙酸乙酯相、苦竹乙酸乙酯相和糙叶树乙酸乙酯相提取物抑制水稻白叶枯病菌测定MIC值分别为12.5μg/m L、12.5μg/m L、12.5μg/m L、25.0μg/m L、25.0μg/m L、25.0μg/m L、25.0μg/m L、25.0μg/m L。2.用刃天青显色-微量稀释法快速测定提取物对三种真菌的抑制活性,并选择活性较高的植物进行室内毒力测定。结果表明:糙叶树乙酸乙酯相提取物抑制番茄灰霉病菌测定MIC值达5μg/m L,EC50为484.897μg/m L;糙叶树乙酸乙酯相、黄山栾乙酸乙酯相和杜英乙酸乙酯相提取物抑制小麦赤霉病菌的MIC值达5μg/m L,EC50分别为552.221μg/m L、345.636μg/m L和995.569μg/m L;迷迭香乙醇提取物和糙叶树乙酸乙酯相提取物抑制苹果炭疽病菌测定MIC值分别为5μg/m L,EC50分别为1086.927μg/m L和667.010μg/m L。3.糙叶树乙酸乙酯相馏份的生物活性追踪。通过抑菌活性试验,糙叶树乙醇提取物各个萃取相馏份的生物活性比较,乙酸乙酯相提取物抑制细菌和真菌的生物活性要远高于其他馏份提取物。乙酸乙酯相馏份提取物经过中压制备后得到10个馏份,其中F6抑制金黄色葡萄球菌和的水稻白叶枯病菌的MIC值分别为50.0μg/m L和100.0μg/m L;F7抑制两种细菌的MIC值均为200.0μg/m L。抑制真菌的馏份主要集中在F7和F8,其中F7抑制小麦赤霉病菌和番茄灰霉病菌的EC50为1992.947μg/m L和2773.169μg/m L;F8抑制小麦赤霉病菌和番茄灰霉病菌的EC50值分别为2558.705μg/m L和3126.421μg/m L。4.糙叶树正丁醇相馏份化学成分制备分离。糙叶树正丁醇相馏份先用AB-8大孔树脂进行初分离,用葡聚糖凝胶再次分离,最后使用高压液相制备色谱进行分离纯化,获得了4种化合物对照品。HPLC检测其纯度均大于98%,用NMR等手段进行鉴定,4种化合物均首次在糙叶树中分离制备得到。
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