【摘 要】
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聚羟基脂肪酸酯(PHA)因其生物相容性、生物可降解性和机械性能可调节性,而被应用于医用生物材料中。大量的研究显示,PHA基质可促进细胞增殖和组织修复。在本研究中主要观察整
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聚羟基脂肪酸酯(PHA)因其生物相容性、生物可降解性和机械性能可调节性,而被应用于医用生物材料中。大量的研究显示,PHA基质可促进细胞增殖和组织修复。在本研究中主要观察整合素调控PHA基质上成骨细胞的行为。结果显示,PHA (PHB / PHBV / P3HB4HB(P34HB) / PHBHHx / PHBVHHx)材料制备的膜(基质)同组织培养板(TCP)和聚乳酸(PLA)一样能支持成骨细胞的黏附和增殖;但是,在PHBHHx和PHBVHHx材料上的细胞增殖较弱且有较多的凋亡和坏死细胞。相比与其他材料,PHBHHx材料上的细胞有较高的整合素亚基α2表达;PHBHHx和PHBVHHx材料上的细胞有较高的整合素亚基β3表达。然而,全部材料上的细胞都有着基本相同的桩蛋白(paxillin)、纽蛋白(vinculin)、粘着斑激酶(FAK)、磷酸化FAK(pY397)和活化FAK(磷酸化FAK占总FAK比率)的表达。此外,相比与TCP, PHBHHx和PHBVHHx材料上的细胞显示出较弱的Cyclin D1 mRNA的表达,虽说它们没有显著性差异。基于整合素在黏附型细胞中发挥着介导细胞间及细胞和细胞外基质(ECM)之间的相互识别和粘连,传导细胞信号的作用,上述实验结果可能暗示了整合素(α2和β3)调控了PHA基质上细胞的黏附和增殖。然而,PHA基质上的细胞快速增殖是否暗示PHA有致癌的可能性尚不清楚。本章初步分析在PHA材料上生长的原代成骨细胞(至少到第8代)没有发生细胞癌变。用BrdU客观估计了材料上细胞的增殖能力,用Real-time PCR分析了癌相关基因Ki67、p53和c-Fos的表达,结果显示材料上细胞的增殖是在正常细胞周期调控下进行的。更重要的是,只在骨癌细胞系UMR-108中发现DNA异倍体、端粒酶活性及更长的端粒长度,而材料上的增殖细胞表现出正常的细胞状态。这一结果暗示了PHA可能没有或只有很弱的细胞致癌性,因此PHA材料可以比较安全的应用于组织工程中。
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