识别SO32-和生物硫醇的芘类荧光探针及应用

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亚硫酸盐(SO32-)、半胱氨酸(Cys)和同型半胱氨酸(Hcy)是一类含有硫原子的生物活性硫小分子物质,这类物质普遍存在于生物体内,参与生物体内的各项生理功能,维持体系平衡。但是,当这些物质在体内含量过高时,便会引发多种疾病,造成生理紊乱。因此,本论文以芘为荧光基团设计合成了三种荧光探针,并分别用于检测SO32-和Cys/Hcy。主要内容如下:1.设计合成了一种增强型荧光探针用于SO32-的识别与检测(探针1)。在DMSO/PBS(10 mM,pH 7.40,v/v,1/1)条件下,探针1本身在420 nm处有微弱的发射峰,SO32-的加入使得发射发生短距离红移且荧光信号增强。荧光光谱数据表明,该探针在456 nm处具有稳定的光谱性质,极高的选择性和抗干扰能力,良好的线性关系以及极低的检测限(0.17μM)。与此同时,该探针成功地用于检测HepG2细胞外源性的SO32-。2.构建了一种通过α,β-不饱和酮将芘和2-氯吡啶共轭的小分子化合物(探针2)。该探针通过一步反应以良好的产率获得,并且通过Cys/Hcy亲核加成进攻碳碳双键来破坏空间效应,使探针2发出荧光信号。研究表明该探针对Cys/Hcy具有极好的选择性和特异性,并具有良好的可逆性。此外,该探针暗示了体内成像的潜力,在HepG2细胞、斑马鱼和拟南芥中成功进行了荧光成像并且得到证实。3.基于芘和喹啉衍生物合成了一种可以特异性识别Cys的新型荧光探针(探针3)。在370 nm的激发下,探针3本身在560 nm处有发射峰,但是当加入Cys后发射峰蓝移至462 nm处并且荧光强度逐渐增强。同时,该探针响应时间非常快,在2 min内即可完成反应。通过荧光共聚焦成像实验验证了探针3可以检测HeLa细胞内源性和外源性的Cys。
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