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正常成熟的精子是哺乳动物顺利完成生殖过程的必要条件。FSH是调节精子发生最重要的内分必因素之一，它通过调节支持细胞(Sertoli cell，SC)功能，间接刺激精子发生。研究表明，仔猪睾丸支持细胞胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line derived neurotrophic factor，GDNF)是调节精原细胞增殖分化的重要内部调节因子(Meng X，2000)，GDNF由支持细胞分泌，受FSH调控(Tadokoro Y，2002)。本论文以原代培养仔猪睾丸支持细胞为实验模型，研究了FSH对GDNF表达的调节。 免疫组化(immunhistochemistry)研究结果发现：在幼龄阶段(2-4周龄)，GDNT蛋白主要表达于间质细胞区，而在曲细精管内未见表达。从第2月龄开始，GDNF蛋白在曲细精管内的支持细胞胞浆出现阳性信号，呈较低水平表达。随着年龄的进一步增长，GDNF在睾丸曲细精管内的表达也不断增强，到成年时GDNF蛋白表达水平达最高。RT-PCR结果显示，仔猪出生后2周，睾丸中即存在GDNF mRNA的表达，随着年龄的增加，GDNF mRNA水平持续升高，到2月龄和6、18月龄分别与出生2周时有显著性(P<0.05)和极显著性(P<0.01)差异，其中第6月龄达高峰。实验结果表明，GDNF可能直接参与了出生后仔猪睾丸发育调节，并在调节精子发生中起着重要作用。 为了了解FSH对支持细胞GDNF蛋白的调控机制，我们以原代培养SC为实验模型，研究了FSH对SC增殖及其GDNF表达的影响。结果显示：(1)FSH可以延长SC的体外存活时间，促进SC的体外发育、贴壁和扩展，当FSH浓度为50ng／ml，作用48小时，其作用效果最强，证实FSH是早期仔猪SC培养时的必要添加成分。(2)FSH还促进了SC增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen，PCNA)的表达，FSH(50ng／ml)处理细胞15min，即可检测到PCNA；作用时间达30min时，PCNA的表达达显著水平；到2h，PCNA蛋白水平达到最高，随后逐渐降低。表明FSH促进SC增殖呈时间依赖性关系。(3)外源性添加FSH可促进GDNF蛋白表达，而且这种促进作用具有浓度和时间依赖关系：GDNF蛋白水平随着FSH浓度增加而升高，当FSH浓度为50ng／ml时，GDNF水平达到最高，然后逐渐降低；FSH(50ng／ml)作用30min，可显著促进GDNF蛋白的表达；当FSH作用1小时，GDNF蛋白水平达到最高，随后逐渐降低。 通过向体外培养的4周龄的仔猪睾丸支持细胞中加入信号通路中蛋白激酶的调节因子，研究了FSH对GDNF蛋白的调节作用及信号传导机制。实验结果表明：(1)FSH(50ng／ml)处理SC，可迅速激活MEK激酶，随FSH刺激时间的延长，ERK1／2活性逐渐升高(0-2h)；(2)dbcAMP(100μM)同样能迅速激活MEK激酶，诱导GDNF蛋白、mRNA的表达：ERK1／2活性的浓度随dbcAMP刺激时