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第一部分:显微注射法制备转基因小鼠的技术研究;第二部分:ES细胞分离、培养以及转基因操作;第三部分:四环素调控系统在细胞水平的基因调控表达研究;第四部分:总结。1、建立了用显微注射法制备基因小鼠的技术方法流程;2、在胚胎操作方面,建立了一种简易有效的输卵管移植的新方法,建立了两种胚胎移植前活检方法以及建立了小鼠卵母细胞体外成熟和体外受精实验方法;3、ES细胞培养保持增殖和未分化状态是进行ES细胞育种、遗传操作以及分化发育研究的前提条件;4、国外目前使用的ES细胞秒几乎都来自129系,国内尚无自建的ES细胞系;5、将绿色荧光蛋白(GFP)基因转染ES细胞获得稳定高表达GFP的新型细胞系,使绿色荧光蛋白成为ES细胞的"活细胞"探针,使其非常方便地示踪ES细胞的活动、演变,为研究ES细胞的分化、发育以及遗传操作等研究提供了有力的工具;6、建立了简易衫的囊胚腔注射新方法,即直接用平头针管代替斜口针管进行囊胚腔注射;7、首次建立了四环素调控系统中Tet-on人肝癌7402细胞系,记为HD1Tet-on7402,该细胞系具有高诱导表达、无泄露、可以及定量调控表达的特点,它为四环素调控系统在细胞水平上的应用研究提供了新的"通用型"细胞系;8、构建了含绿色荧光蛋白(GFP)的四环素调控表达系统的新型载体即将GFP基因构建到四环素调控系统反应组分。