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研究目的：在多种恶性肿瘤中,YB-1表达水平的增高可促进肿瘤的发生发展。而在胰腺癌中YB-1的表达情况,是否影响胰腺癌进展,特别是其作用机制,并没有明确的报道。本研究旨在探讨YB-1在胰腺癌中的表达及与胰腺癌进展的关系,并深入探讨YB-1发挥生物学效应的分子机制。实验方法：本研究通过免疫组织化学(IHC)检测90对胰腺癌和癌旁组织中YB-1的表达,并分析YB-1的阳性表达与胰腺癌分化程度的相关性。分析通过western blot法检测胰腺癌细胞系中YB-1的表达。使用慢病毒沉默技术抑制胰腺癌细胞系中YB-1的表达,通过CCK-8法和流式细胞术检测YB-1沉默对于胰腺癌细胞系增殖能力和对细胞周期的影响。通过western blot检测其对细胞周期相关蛋白表达的影响。通过western blot法和qPCR法检测YB-1沉默的胰腺癌细胞中GSK-3β蛋白表达和mRNA表达的变化。使用慢病毒技术过表达胰腺癌细胞系中的YB-1,通过western blot法检测YB-1过表达的胰腺癌细胞系中GSK-3β表达的变化。应用GSK-3β抑制剂TWS119,通过CCK-8法和流式细胞术检测其过表达以及加用GSK-3β抑制剂对胰腺癌细胞增殖能力及细胞周期的影响,是否能够逆转过表达YB-1的作用。应用PI3K/AKT、 MEK/ERK信号通路抑制剂,通过Western blot技术检测在胰腺癌细胞系中,细胞信号通路对YB-1的调控的机制。实验结果：YB-1在胰腺癌中显著高于癌旁组织,且与胰腺癌临床分化程度呈正相关。YB-1在胰腺癌细胞系中高表达。使用慢病毒沉默胰腺癌细胞中YB-1的表达后,可以显著抑制胰腺癌的增殖,并使胰腺癌细胞出现G1期阻滞,慢病毒过表达的胰腺癌细胞系中,GSK-3β表达明显上调,增殖能力显著增强,G1期细胞比例明显减少。抑制YB-1后,胰腺癌细胞中GSK-3β mRNA水平明显降低,且蛋白表达水平变化与mRNA水平变化一致；相反,过表达YB-1后,GSK-3β mRNA与蛋白表达均表达明显上调。使用GSK-3β特异性抑制剂处理YB-1过表达的胰腺癌细胞系后,YB-1过表达所致的细胞增殖能力增强被抑制,且CyclinD1、E1蛋白表达水平与细胞增殖水平变化一致。应用PI3K/AKT及MEK/ERK信号通路的抑制剂发现,YB-1同时受这两条信号通路调控,其中PI3K/AKT在转录水平调控,MEK/ERK在翻译水平调控。研究结论：YB-1过表达是胰腺癌具有高度恶性生物学行为的重要机制,其通过调控GSK-3β的表达促进胰腺癌细胞的增殖与肿瘤进展。YB-1和GSK-3β具有成为成为胰腺癌治疗的靶点的潜力。