纳他霉素发酵工艺优化初步研究

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纳他霉素(Natamycin)是由纳他尔链霉菌经过发酵得到的一种次级代谢产物,是一种多烯大环内酯类天然强效抗真菌剂。作为一种无毒、无任何副作用的天然食品防腐剂,必将会得到更广泛的使用。因此将在工业规模上将现有的纳他霉素菌种生产能力进一步提高,对于现有的生产和未来的技术储备具有极强的战略意义。本论文通过初步探讨纳他霉素的菌种及发酵工艺,主要得到如下结论:斜面种子的最适温度:30℃下,培养9天,斜面生长饱满,且效价单位稳定。最优的摇瓶种子培养基的配方为:糊精30.0 g,淀粉2.0 g,葡萄糖3.0 g,蛋白胨5 g,低温豆粉3.0 g,K2HPO4·3H2O 0.2 g,Ca CO3 1.0 g,自来水1 L,p H 7.0。摇瓶种子最适培养条件:250 m L三角瓶装量40 m L,转速为220 r/min。摇瓶发酵的最适培养基配方为:葡萄糖0.5 g,糊精20.0 g,淀粉40.0 g,蛋白胨(工业)7.5 g,低温豆粉18 g,NH4NO32.5 g,K2HPO4 0.5 g,M g SO4·7H2O 0.5 g,KC1 0.3 g,Ca CO3 3.0 g,自来水1 L,p H 7.0。摇瓶发酵最适条件:1000 m L三角瓶装量150 m L发酵液,转速为220 r/min,接种量5%,发酵周期8天,最适初始p H为7.0,1‰泡敌为消泡剂。通过30 L发酵罐进行验证与放大,最适条件为装料体积接种后18 L,消毒前用Na OH调节p H值为7.0,消毒条件121℃,30 min,发酵温控30℃,罐压0.05 Mpa,全程p H值自控6.5,搅拌400 r/min,通气量:1:0.8(V/V),放罐标准:根君菌体显微镜下形态和残糖、氨氮、溶氧等指标。30 L发酵罐自控最适p H值6.5验证效价结果稳定在6512μg/m L左右,比最初拿到菌种时效价为4000左右提高了62.8%。
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