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目的:观察盐霉素对人前列腺癌PC-3细胞体外增殖的影响;观察盐霉素对PC-3细胞中CD44+及CD133+双阳性细胞及其形成微球体的影响;从PC-3细胞中筛选出与盐霉素作用密切相关的基因组。材料与方法:1:采用MTT法检测不同浓度盐霉素作用后PC-3细胞的活性,酶标仪在570nm波长下测定其吸光值,绘制曲线并计算出IC50;2:将培养的PC-3细胞分为A、B、C三组,A组为空白对照组,B组为加9uM DMSO溶媒对照组,C为加9uM盐霉素的实验组,各组内再分别予CD133鼠抗人单抗、CD44鼠抗人单抗及两种抗体同时标记,予流式细胞仪检测盐霉素作用前后各组细胞的阳性比例,统计学软件进行数据分析;3:将分选的干细胞培养成肿瘤微球体,显微镜下观察肿瘤微球体的变化,并观察盐霉素作用后微球体的解聚情况;4:通过microarray技术检测盐霉素作用前后PC-3细胞的基因表达谱,并采用Treeview软件对基因表达谱进行差异性分析,以上调或下调10倍以上为标准,筛选出与盐霉素作用密切相关的靶基因组,统计学分析筛选出最具代表性的2个靶基因,探讨基因的功能。结果:(1)不同浓度的盐霉素对PC-3均有抑制作用,其IC50为9.12μmol/ml。(2)与空白对照组相比较,盐霉素组中CD44+、CD133+细胞及双阳性细胞的比例均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)与DMSO组相比较,盐霉素组CD44+、CD133+细胞及双阳性细胞的比例均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)与空白对照组相比较,DMSO组CD44+、CD133+细胞及双阳性细胞的比例无明显降低,差异无统计学意义(P>0.05)。(5)盐霉素能促进肿瘤微球体的解聚,使细胞体积增大,肿胀而死亡。(6) microarray检测结果显示:表达10倍以上下调的基因15个,表达10倍以上上调基因的34个,其中, POSTN基因下调13.2倍,CALB2基因上调47.55倍。结论:(1)盐霉素能有效抑制体外人前列腺癌PC-3细胞的增殖。(2)盐霉素能明显降低PC-3细胞中CD44+及CD133+细胞的比例,并能促使肿瘤干细胞形成的肿瘤微球体的解聚,其可能是通过杀灭前列腺癌肿瘤干细胞来抑制PC-3细胞的生长。(3)盐霉素能改变PC-3细胞的基因表达,明显上调CALB2基因的表达及下调POSTN基因的表达。