【摘 要】
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结核分枝杆菌(M.tuberculosis)感染引起的结核病严重危害公共卫生安全。近年来,抗多药结核分枝杆菌的出现和迅速蔓延给结核病的防治带来了严峻挑战。同时,结核分枝杆菌抗药性
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结核分枝杆菌(M.tuberculosis)感染引起的结核病严重危害公共卫生安全。近年来,抗多药结核分枝杆菌的出现和迅速蔓延给结核病的防治带来了严峻挑战。同时,结核分枝杆菌抗药性产生及调控的机制也十分不清楚。本研究在实验室前期工作基础之上,对一个ArsR家族转录因子Rv2642介导的耐药性机制进行了初步研究,取得了以下结果:1)在牛分枝杆菌(M bovis BCG)中超表达Rv2642能够增强该菌株对一线抗结核药物异烟肼(INH)的抗性;2)通过凝胶阻滞电泳实验(EMSA)证实Rv2642能够特异性地结合自身启动子DNA;3)DNA足迹和EMSA实验证实Rv2642结合DNA的保守motif为一段长36 bp的回文结构GATTCGATATTTGTCAAT ATTGATGTATGTCGAATC,其识别的关键碱基为TCAATATTGA;4)β-半乳糖苷酶实验及qRT-PCR实验证实Rv2642负调控自身以及相邻基因Rv2641(编码镉诱导蛋白cadI)、Rv2643(砷转运膜内蛋白arsC)的表达;5)在牛分枝杆菌(M.bovis BCG)中敲除Rv2642的同源基因(同源性100%)导致该菌株对INH敏感。因此,本研究成功鉴定了一个ArsR家族转录因子Rv2642结合的DNA保守motif及其介导的调控作用,首次证实了 Rv2642能够影响分枝杆菌对一线抗结核药物异烟肼的抗性。这些结果丰富了我们对转录因子介导的分枝杆菌抗药机制的了解。
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