基于代谢组学技术研究不同海拔及泡法青钱柳叶化学成分差异及袋装茶工厂设计

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青钱柳(Cyclocarya paliurus(Batal.)Ijinskaja)是我国特有的一种珍稀树种,其根、枝、叶均可入药,并主要分布于我国南方部分省内海拔为420~2500 m的山区。因其地理分布的差异,受不同生长环境和气候差异等因素的影响,从而造成青钱柳叶的化学成分及含量出现差异。除此之外,青钱柳叶可被制成茶叶或晒干后直接泡制,广受消费者的追捧与热爱,特别是在中国南方某些地区,用热水冲泡晒干后的青钱柳叶是当地的古老传统。冷泡茶由于操作便捷,能最大限度地减少泡制过程中的热损耗,近年来已逐渐成为一种时尚的饮品。本实验选用GC-MS和UPLC-QTOF-MS技术对不同海拔来源青钱柳叶的化学成分及差异进行分析,对数据进行多元统计学分析,并构建分类模型,从而建立青钱柳叶海拔溯源的新方法。其次,采用非靶向代谢组学方法,研究不同泡制方法对青钱柳叶溶出物的影响。最后,设计了青钱柳叶袋装茶工厂,并对工艺流程及项目投资情况进行概述。本论文的主要研究内容及结论归纳如下:第1章:详述了近年来国内外关于青钱柳叶的各类化学成分及其活性方面的研究成果。青钱柳叶富含黄酮、酚酸、三萜及多糖等化合物,并在降血糖、抗增殖、免疫调节及改善血脂平衡等方面有着不俗的治疗效果。不同地理来源的青钱柳叶,在多糖、萜类及酚酸含量上呈现显著差异性,同时不同泡法对植物生物活性物质的溶出效果也存在差异。除此之外,对代谢组学中的样本采集与制备、代谢物的分离检测及数据分析等环节进行了论述,并结合代谢组学的应用,阐述代谢组学在探究植物化学成分与环境因素的关联性及冷泡法对植物化学成分的影响。第2章:采用顶空固相微萃取结合气相色谱三重四极杆串联质谱(HSSPME-GC-MS)技术对不同海拔高度(200-1000 m)青钱柳叶的挥发性成分进行分析,探寻不同海拔青钱柳叶挥发性成分的差异。实验初步鉴定出56种挥发性成分,其中萜烯、醇类、醛类及酮类等物质为主要挥发性成分。基于PLS-DA模型中的VIP>1.0原则,实验共筛选出16种关键性差异化合物,分别为月桂烯、2,4-庚二烯醛、壬醛、癸醛、衣兰烯、可巴烯、β-波旁烯、丁香烯、香叶基丙酮、β-芹子烯、δ-杜松烯、α-白菖考烯、石竹素、植酮、棕榈酸甲酯、泪柏醚。本研究为GC-MS应用于不同海拔来源的青钱柳叶成分差异分析提供参考。第3章:采用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱(UPLC-QTOF-MS)技术对不同海拔高度(200-1000 m)青钱柳叶的非挥发性成分进行分析,探寻不同海拔青钱柳叶非挥发性成分的差异。一方面,400 m海拔来源的青钱柳叶具有更高的总酚(117.20±2.10 mg GAE/g)和总黄酮(0.91±0.06 mg RE/g)含量,显著高于其他来源的样本(P<0.05)。另一方面,通过计算每个化合物的VIP值和P值,筛选出15个标志性化合物,并可用于DD-SIMCA和ROC模型判别。结果表明,基于UPLC-QTOF-MS的非靶向代谢组学可为不同海拔高度青钱柳叶的鉴别提供合适的方法。第4章:采用基于UPLC-QTOF-MS的非靶向代谢组学方法,比较了三种青钱柳叶泡制方法在溶出物方面的差异。一方面,作为一种特殊的方法,冷泡法可促进某些活性物质的释放或溶解,在已发现的15种差异化合物中,其含有的阿魏酸、水杨酸、对香豆酸和没食子酸的含量最高。另一方面,煮泡法或浸泡法对黄酮类化合物的释放或溶解有着促进作用。本研究为冷泡法在青钱柳叶的应用中提供了依据,可促进以青钱柳叶为原料的凉茶发展。第5章:对青钱柳叶袋装茶的工厂生产进行阐述,并设计生产工艺流程、选择工艺所需的设备及估算年利润。根据客观条件及生产实际,分析了工厂选址于修水县黄坳乡的可行性,并结合生产设备型号及规格,对厂区的整体布局进行了初步规划。另外,结合实际生产要求及产品价值,估算了原材料、水电及人工等成本,综合生产成本、前期投资费用及利润进行资金回收期的估算,预计5年后可盈利。以上工作对青钱柳茶包工厂的建设奠定了理论基础。
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