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[目的]研究碱热处理的钛片表面对成骨细胞整合素α2β1,整合素α5β1的影响。[材料和方法]本实验用SD胎鼠颅顶骨组织块培养法进行成骨细胞原代培养。用倒置显微镜观察原代成骨细胞的生长情况,并利用HE染色、碱性磷酸酶染色及钙化结节茜素红染色进行成骨细胞鉴定。将直径为15mm,厚lmm的医用纯钛钛片分组进行表面处理：①以240目、360目、600目砂纸逐级打磨得到机械打磨组(grooved,G组)；②采用356-411μmTiO2喷砂处理,得到喷砂组(sandblasted,SB组)；③以63.6%的H2S04和10.6%的HCL混合液在60。C时酸蚀SB组的钛片10分钟得到酸蚀组(sandblasted and acid-etched,SLA组)；④由G组、SB组、SLA组,经5moL/L氢氧化钠60。C水浴14小时,600。C处理1小时,得到光滑碱热组(grooved alkali-heated,AH1组)、喷砂碱热组(sandblasted alkali-heated,AH2组)、喷砂酸蚀碱热组(acid-etched and alkali-heated,AH3组)。用扫描电镜、轮廓测量仪检测6组钛片表面理化性质。将成骨细胞接种于六组钛片上,在1、3、5天收集所培养的成骨细胞。利用RT-PCR定量免疫荧光法检测成骨细胞整合素亚基α2、整合素亚基a5、整合素亚基β1mRNA的表达水平。数据采用单因素方差分析及配对t检验(a=0.05)。[结果]本实验采用的体外组织块法操作简便,骨量消耗小,细胞产量大、纯度高,能满足实验需求。培养的成骨细胞经鉴定符合成骨细胞的生物学特性,并具有良好的活性。体外培养的大鼠成骨细胞膜上均能持续表达整合素亚基α2、整合素亚基α5、整合素亚基β1。整合素亚基p1表达水平最高,其次为整合素亚基α2,整合素亚基α5相对最低。本实验中,SB组钛片表面处理后成骨细胞整合素表达水平最高,AH1组较G组、AH3组较SLA组的表达水平要高,AH1组、AH1组和AH3组表达水平接近。在本实验观察时段中,随着时间的延长,整合素亚基α2、整合素亚基α5、整合素亚基β1mRNA的表达水平有一定程度的增长。[结论]1.实验采用组织块法培养成骨细胞,操作简便,骨量消耗小,细胞产量大、纯度高,能满足实验需求。获得的成骨细胞经鉴定符合成骨细胞的生物学特性,并具有良好的活性。2.实验引物特异性佳,扩增效率高,成功检测到3种目标整合素亚基,扩增出相应目的片段,合乎实验要求。3.SB组钛片成骨细胞整合素亚基a2、整合素亚基a5、整合素亚基p1表达量最大,SB组有利于成骨细胞粘附。4.碱热处理表面对成骨细胞整合素亚基a2、整合素亚基α5、整合素亚基β1表达有一定促进作用,有利于成骨细胞粘附。