目的：建立大鼠液压冲击颅脑损伤模型,探讨人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells, hUC-MSCs)移植对颅脑损伤大鼠神经功能恢复的影响以及移植细胞的存活、迁移和神经分化情况，为其在颅脑损伤治疗的应用提供理论依据。方法：取足月妊娠剖宫产健康新生儿的脐带，利用酶消化法和贴壁法获得原代细胞，传3~5代备用。收集消化后的细胞，流式细胞学检测CD45PE、CD90PE、 CD105PE、CD73PE、CD11b PE和CD34FITC、CD19FITC， HLA-DR PE，并以小鼠IgG1-PE和小鼠IgG1-FITC作为同型对照。选取成年健康雄性Sprague-Dawley (SD)大鼠，体重约260g～320g，制作液压冲击颅脑损伤模型。模型制备成功24小时后，采取改良神经功能评分（modified Neurological Severity Score, mNSS）对其进行神经功能评价（Table1），选取评分为7～12分（中度）的50只大鼠进入实验。将其随机分为三组：⑴hUC-MSCs移植组：20只，细胞移植前用噻唑蓝[3-(4,5)-dimethylthiahiazol-2-y1-2,5-diphenytetrazolium bromide，MTT]检测细胞活力。将第5代hUC-MSCs移植到大鼠颅脑损伤部位。⑵磷酸盐缓冲液（phosphate buffered saline, PBS）组：20只，用PBS替代hUC-MSCs注射到颅脑损伤部位。⑶单纯颅脑损伤：10只，行开骨窗和颅脑损伤处理，但不移植hUC-MSCs。另外，再随机选取10只大鼠为⑷假手术组，只开骨窗，不行颅脑损伤处理，亦不行细胞移植。四组大鼠分别采用改良的神经功能评分(modified neurologicalseverity score，mNSS)在hUC-MSCs移植或PBS注射后的第１天、7天、14天、21天、28天进行神经功能评分，观察其神经功能改善情况。评分结束后采用RT-PCR技术检测移植细胞胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillaryacidic protein,GFAP)、神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)、巢蛋白(Nestin)以及髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein，MBP)的表达情况，并进行比较。结果：细胞接种4～6h后观察到少量细胞贴壁，12h以后大部分细胞贴壁。接种7d时，细胞汇合达到80％～90％，消化后按1:2或1:3的比例传代。细胞传代后，形态均一，生长迅速，3-4d可传一代。流式细胞学检测结果显示：hUC-MSCs表达间充质干细胞表面抗原CD105、CD73、CD90，不表达B型淋巴细胞表面抗原CD19、造血前体细胞表面抗原CD34、白细胞表面抗原CD45、中性粒细胞表面抗原CD11b和HLA-DR，表示该细胞是hUC-MSCs且具备异体移植的可行性。细胞移植前采用MTT法检测hUC-MSCs细胞活力好，台盼蓝染色显示细胞存活率达95%以上。hUC-MSCs移植后28d内，hUC-MSCs移植组死亡2只，死亡率为10.0%；PBS组死亡6只，死亡率为30.0%；单纯颅脑损伤组死亡4只，死亡率40.0%。hUC-MSCs移植组死亡率低于单纯颅脑损伤组和PBS组，差异有统计学意义（P<0.05）。神经功能评分结果（Table3）显示，hUC-MSCs移植组随着时间的变化神经功能恢复优于单纯颅脑损伤组，差异有统计学意义（P<0.05）。hUC-MSCs移植28天，神经功能评分结束后，取新鲜脑组织提取总RNA,应用RT-PCR从分子生物学证实了移植的hUC-MSCs在大鼠颅脑损伤部位存活并表达GFAP、NSE、Nestin，未表达MBP。结论：1人脐带间充质干细胞移植促进大鼠颅脑损伤后神经功能的恢复。2移植的hUC-MSCs在大鼠颅脑损伤部位存活并表达GFAP、NSE、Nestin，未表达MBP。