[目 的]中枢神经系统(CNS)损伤后的轴突再生在成年哺乳动物中是非常有限的,作为CNS非常重要的一部分,视神经损伤后会引起视网膜神经节细胞(RGCs)的凋亡甚至导致视力丧失,近年来越来越多的证据表明几丁聚糖在多种神经退行性疾病中具有神经保护作用,本课题拟利用经典的大鼠视神经夹持模型,探索几丁聚糖在外伤性视神经损伤中的保护作用。[方 法]将72只成年SPF级雌性SD大鼠随机分成假手术组(n=12),TON组(n=30),几丁聚糖组(n=30)。假手术组大鼠右眼只剥离神经鞘膜,不作夹持处理;TON组和几丁聚糖组大鼠右眼为手术眼,采用夹持力度为50 g的视神经夹持镊在球后2 mm处夹持视神经10 s,建立大鼠视神经夹持模型;三组中所有个体左眼均不作任何处理。在建立大鼠视神经夹持模型前三天几丁聚糖组每天给予300 mg/kg几丁聚糖灌胃,TON组给予同等体积的1%乙酸溶剂。其中,18只大鼠(假手术组n=6,TON组n=6,几丁聚糖组n=6)用于电生理实验,分别在建模后3d、7d、14d、21d采集F-VEP数据。54只大鼠(假手术组n=6,TON组n=24,几丁聚糖组n=24)用于免疫组化实验,分别在建模后3d、7d、14d、21d处死取材,保留眼球和视神经进行冰冻切片进行免疫荧光检测,观察大鼠视网膜RGCs的存活情况,视神经轴突再生情况以及星形胶质细胞的变化;并采用免疫荧光共定位观察星形胶质细胞与IL-1β、BDNF的共表达情况。[结 果]罗兰电生理结果显示:假手术组出现了典型的F-VEP波形,TON组出现明显的异常波形改变,具体表现为N1波延迟,N1-P1波振幅缩减;给予几丁聚糖灌胃21d后发现,N1波延时和N1-P1波振幅均得到恢复,提示视神经传导通路得到改善。免疫荧光单染结果显示:与假手术组相比,视神经夹持损伤后,RGCs数目随着时间的延长而逐渐减少;而给予几丁聚糖灌胃后发现在视神经夹持损伤后7d、14d、21d RGCs数目都不同程度地增加,且与TON组有显著差异(P<0.05)。在假手术组和TON组视神经中GAP-43没有表达,视神经没有再生;而夹持14d和21d后的结果发现几丁聚糖组的GAP-43表达明显增加,且与TON组有显著差异(P<0.05)。假手术组中静息的星形胶质细胞表达在视网膜神经节细胞层和神经纤维层;在夹持视神经3d后,星形胶质细胞呈现激活状态,GFAP阳性细胞纤维开始延伸;夹持视神经7d、14d、21d后,GFAP纤维进一步延伸至内网层;而经过几丁聚糖灌胃后却发现,GFAP反应被明显抑制,星形胶质细胞增生减弱,延伸也受到抑制。免疫荧光共定位结果显示:假手术组中,星形胶质细胞表达极少量的IL-1β;而视神经夹持损伤3d、7d、14d、21d后,星形胶质细胞活化增生,且产生IL-1β促使炎症发生;而在几丁聚糖灌胃以后发现星形胶质细胞表达的IL-1β均较TON组减少。在视神经夹持损伤14d后,假手术组和TON组中没有观察到BDNF表达;而给予几丁聚糖灌胃后,促进了星形胶质细胞表达BDNF。[结 论]在视神经夹持损伤后发现,几丁聚糖可以减少RGCs死亡,促进视神经的轴突再生以及促进大鼠视觉功能F-VEP的恢复;进一步研究发现几丁聚糖的神经保护功能可能依赖于抑制视网膜星形胶质细胞的活化,抑制IL-1β以及促进BDNF的表达。本研究证实了几丁聚糖可以保护修复受损的视神经,为临床上预防、治疗外伤性视神经病变提供理论依据。