【摘 要】
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目的:研究锰对体外培养Sertoli细胞的影响,探讨锰引起雄性生殖危害的作用机制。方法:健康雄性20天龄SD大鼠睾丸,分离纯化Sertoli细胞并鉴定。培养第六天分别给以1,10,50,100,
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目的:研究锰对体外培养Sertoli细胞的影响,探讨锰引起雄性生殖危害的作用机制。方法:健康雄性20天龄SD大鼠睾丸,分离纯化Sertoli细胞并鉴定。培养第六天分别给以1,10,50,100,200μmol/L的MnCl2染毒,对照组给以同体积的DMEM培养液,24小时收集细胞。100μmol/L的MnCl2剂量组染毒细胞,分别于染毒第0h,6h,24h,48h收集细胞。采用实时荧光定量PCR（Real-time PCR）检测Sertoli细胞的苗勒管抑制物（MIS）、雄激素结合蛋白（ABP）和卵泡刺激素受体（FSHR）的mRNA表达。细胞染Mn24h后,用ELISA检测FSHR蛋白表达情况。结果:与对照组比较,随着染毒剂量的增加（1,10μmol/L）ABP的mRNA表达先增加（P＜0.01）,但随着剂量继续增加（50,100,200gmol/L）ABP的mRNA表达降低（P＜0.01）,与10μmol/L浓度组比较,随着剂量增加（50,100,200μmol/L）ABP的mRNA表达降低,差异有显著性意义（P＜0.01）;FSHRmRNA表达结果和上清液中FSHR蛋白质检测结果具有与ABP同样的趋势。与对照组比,MIS mRNA表达在各剂量组间均无显著性差异（P＞0.05）。随着染毒时间增加,与对照组比较,ABP的mRNA表达先增加（6h）（P＜0.05）,但随着时间继续增加（24h,48h）,ABP的rnRNA表达降低（P＜0.05）;FSHR的mRNA表达在染毒初期（6h）无明显改变（P＞0.05）,随着染毒时间增加mRNA表达降低（P＜0.05,P＜0.01）。结论:50μmoFL以上锰浓度可降低Sertoli细胞ABP的转录水平,降低FSHR的转录和翻译水平,该作用可能是高剂量锰影响生精功能的作用机制之一。
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