两种猪重要病毒性传染病病原主要结构蛋白的可溶性表达与鉴定

来源 :甘肃农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Michellesy
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猪伪狂犬病(PR)发病率逐年升高,已成为除蓝耳病以外严重危害母猪繁殖性能、严重影响猪场的经济效益的最主要传染病之一;口蹄疫(FMD)由于传播迅速、流行面广、难于防治、补救措施少,被称为畜牧业的“头号杀手”。当前,控制这两种严重威胁我国规模化养猪业的健康发展的病毒性传染病的主要措施是疫苗接种,监测PR及FMDV抗体水平、制定合理的免疫程序,接种安全、高效的疫苗已成为规模化养猪场PR及FMD防控的关键。因此建立快速、有效的抗体检测技术,开发新型疫苗对控制和消灭PR及FMD具有重要的意义。本研究采用经小泛素化修饰蛋白促进基因(SUMO)以及组氨酸(His)标签组合的pSMK原核表达系统,对猪伪狂犬病病毒(PRV)的gB全长基因及口蹄疫病毒(FMDV)的结构蛋白(VP1、突变的VP2及VP4)进行了原核表达及鉴定,并进行了FMDV病毒样颗粒的制备。结果显示,PRV的gB基因及FMDV的结构蛋白基因可在SUMO及His标签组合的pSMK原核表达系统进行可溶性表达,表达的可溶性gB蛋白具有较好的反应原性;表达的可溶性FMDV的突变型VP2蛋白与其它结构蛋白可在体外高效组装出反应原性良好的病毒样颗粒[O型FMDV(S2093C)VLPs]。该研究结果表明SUMO基因及His标签基因组合的pSMK原核表达载体对外源性抗原的可溶性表达具有促进作用,且利用此原核表达系统表达的两种病毒的结构蛋白均具有良好的反应原性,研究结果为进一步建立检测PRV及FMDV抗体的ELISA检测方法及新型疫苗的研制提供了技术资料。
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