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肿瘤的发生发展是涉及到多种因素多个步骤的复杂病理过程,肿瘤的恶性表型是多种因素相互作用导致正常细胞恶变的结果。但毫无疑问地,这个过程必然伴随着基因的改变,而脱氧核糖核苷酸、核糖核苷酸作为DNA及RNA生物合成的前体物质,同时亦参与了体内大多数生物化学过程,在细胞癌变的过程中其含量与代谢方面也必然会受到一定的影响,甚至发生巨大的变化。而且目前临床上正在应用的抗肿瘤药物以及正在进行临床前研究的有效的抗肿瘤化合物绝大部分都是通过干预和调节DNA、RNA和/或它们的前体物(如dNTP、NTP等)的生物合成来发挥作用的。因此我们有必要建立一套快速稳定的分析方法来检测细胞内的NTP及dNTP水平,这对于评价细胞的能量代谢状况及DNA、RNA的生物合成状态至关重要。而这些过程又与细胞周期的调节,病毒的感染及药物的作用有关,因此我们还可以将之用于研究一些具有抗肿瘤药理活性的化合物对DNA及RNA合成的干预调节作用。另外我们还可以利用该方法将正常细胞与肿瘤细胞,不同类型的肿瘤细胞,甚至不同恶性程度、不同发展方向的肿瘤细胞的核酸库进行对比,如果可以从中找出一定的规律及特点,对于进一步在分子水平上认识肿瘤的发生、发展、变化以及临床上对肿瘤的诊断、治疗及预后等都具有一定的提示作用。 到目前为止,已报道过许多方法用来测定细胞及组织内的核酸库水平,包括酶分析,生物发光,31P核磁共振谱(NMR),质谱(MS),高效液相色谱(HPLC),高效毛细管电泳(HPCE),及气相色谱(GC)等,其中31PNMR可检测出所有具有相近化学位移的核苷酸信号,在监测体内核苷酸库的相对变化方面具有很大的潜力。HPLC作为一种常用的核苷酸测定方法已广泛为科研人员所采用。但是由于哺乳动物细胞内的脱氧核糖核苷酸(dNTP)与核糖核苷酸(NTP)含量差别很大,使得二者单次同时测定成为一个难题。过去人们常常在进行dNTP分析前先除去细胞提取物中的NTP,即通过高碘酸氧化法选择性降解NTP。但在应用甲醇作为提取剂时,该方法往往会产生一些干扰性物质与dNTP共洗脱出来,