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对羟基苯甲酸酯是对羟基苯甲酸和不同烷基链的醇脱水缩合而成的一类酯类化合物,主要包括对羟基苯甲酸甲酯(MP)、乙酯(EP)、丙酯(PP)、丁酯(BP)等。这类化合物无色无味,化学性质稳定,具有低毒、抗菌等特点,被广泛用作食品、医药、护理用品的防腐剂。然而,对羟基苯甲酸酯并不是绝对安全,研究表明其具有弱雌激素活性,是一种内分泌干扰物,能够影响生物体生长、生殖及寿命。另外,由于对羟基苯甲酸酯广泛且长期使用,使得其部分蓄积在自然环境和人体内,而且不止一种,可见人体通常暴露于混合酯环境。目前,关于对羟基苯甲酸酯的毒性研究大多只停滞在单一酯的暴露,而混合酯暴露的毒性研究却鲜有报道。因此,混合对羟基苯甲酸酯的毒性研究具有更重要的现实意义。本研究将常用的两种对羟基苯甲酸酯——MP和EP以质量比1:1混合(简写:MP+EP)暴露果蝇,研究其对果蝇生长生殖及寿命的影响。通过将果蝇羽化前阶段暴露于对照和低、中、高的MP+EP培养基(300mg·L-1、700 mg·L-1和1000mg·L-1),观察果蝇羽化前生长及羽化后成蝇生殖力,检测保幼激素(JH)、蜕皮激素(20E)含量以及与生长生殖相关基因EcR、Met、Gce、Foxo、Shade表达;通过将成蝇暴露于对照和低、中、高的MP+EP培养基,记录果蝇寿命及存活率,检测果蝇抗氧化酶SOD活性及脂质过氧化产物MDA含量。研究通过MP+EP对果蝇不同时期的暴露,从内分泌调控和自由基衰老方面探讨混合酯对果蝇生长生殖及寿命的影响。所得结果如下:1、果蝇羽化前阶段暴露MP+EP,幼虫期和生长周期均延长,三龄幼虫鲜重降低,羽化后成蝇生殖力也降低,且中、高暴露组具有显著性差异(p<0.05 or p<0.01),但果蝇的结蛹率和羽化率并没有显著变化。此外,相对于单酯EP毒性,MP+EP对果蝇羽化前生长表现出叠加毒性效应。2、果蝇羽化前阶段暴露MP+EP,中、高暴露组三龄幼虫JH含量显著升高,20E含量显著降低,同时也影响成蝇JH和20E含量,雌果蝇中、高暴露组能显著升高1日龄JH含量,降低3日龄20E含量,雄果蝇中、高暴露组显著降低1日龄和3日龄JH含量。此外,混合酯能不同程度地紊乱果蝇生长和生殖相关基因的表达,一方面通过上调或下调果蝇激素合成相关基因(Foxo和Shade)的表达,使体内正常激素失衡,另一方面它作为一种内分泌干扰物,能诱导或抑制激素受体基因(EcR、 Met和Gce)的表达,从而干扰激素信号通路。3、果蝇成蝇阶段暴露于MP+EP,果蝇存活率、平均寿命、最高寿命及半数死亡时间均缩短,而且MP+EP可降低果蝇SOD活性,增加MDA含量,可见混合酯对果蝇寿命的影响与其体内抗氧化能力的减弱相关。此外,MP+EP对果蝇寿命的毒性比单酯EP大。综合各项研究结果可知,MP+EP可能紊乱果蝇JH和20E平衡,影响激素信号通路,从而使果蝇生长周期延缓,生殖力降低。另外,MP+EP可能降低抗氧化能力,进而使果蝇寿命和存活率降低。本研究通过MP+EP对果蝇不同时期的暴露,初步探究了混合酯对果蝇生长生殖及寿命的影响,为对羟基苯甲酸酯的安全性评估提供数据支持。