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目的： 糖尿病是糖紊乱代谢性疾病，严重危害人类健康。目前，糖尿病发病率逐年上升并且趋向于年轻化，表明并未得到有效控制。防治糖尿病仍需全新的葡萄糖调控机制和药物靶点。时钟因子REV-ERBα（NR1D1）是一种核血红素受体，不仅调控生物节律，还具有调控葡萄糖代谢的潜在性。然而，REV-ERBα调节葡萄糖代谢的机制尚不明确。本论文旨在探索REV-ERBα调控血糖稳态的作用机制，为糖尿病治疗提供新的药物靶点。 方法： 1.采用SR9009（特异性REV-ERBα激动剂）处理鼠肝癌细胞Hepa1c1c7和人肝癌细胞HepG2。采用荧光定量法测定细胞内糖代谢相关酶的基因表达量，确定糖代谢酶的变化趋势。明确靶基因后，采用蛋白质印迹分析法进一步确认其蛋白表达量变化。 2.以野生型C57BL/6小鼠为实验对象，采用25或50mg/kg的剂量腹腔注射SR9009，给药持续五天，一天两次（分别在ZT2和ZT14给药）。给药结束后取血浆和肝脏，测定空腹血糖值和Pck1表达量。 3.采用链脲佐菌素（STZ），构建糖尿病小鼠模型。同时采用25或50mg/kg的剂量腹腔注射SR9009。给药持续五天后取血浆和肝脏，测定空腹血糖值和Pck1表达量。 4.基于荧光素酶报告基因实验，考察Rev-erbα对Pck1启动子转录活性的影响，确定Rev-erbα调控转录的位点。采用凝胶迁移实验和染色质免疫共沉淀法，评价Rev-erbα蛋白与Pck1启动子中RevRE（Rev-erbαresponse element，Rev-erbα反应元件）位点间的相互作用。 结果： 1.SR9009显著抑制细胞内Pck1/PCK1的基因表达。然而，其他糖代谢限速酶没有受到影响。蛋白质印迹分析结果表明，细胞内Pck1/PCK1蛋白表达显著下降。在HepG2细胞中，SR9009对PCK1基因表达的抑制呈现明显的浓度依赖（IC50=0.26μM）。 2.在野生型小鼠中，SR9009处理导致空腹血糖值降低了10%以上。小鼠肝脏中Pck1的基因表达量和蛋白表达量也均出现显著性下降。 3.在糖尿病小鼠中，SR9009使空腹血糖值分别降低了0.25倍和0.43倍（在25和50mg/kg剂量下）。糖耐量实验结果表明，SR9009可改善疾病小鼠的高血糖症状。此外，小鼠肝脏中Pck1的表达也显著下降。 4.荧光素酶报告基因实验表明，Rev-erbα通过与Pck1启动子直接结合抑制Pck1的转录活性。启动子分析实验表明，Rev-erbα反应元件为-325~-320bp。EMSA和ChIP实验进一步证实，-325~-320bp位点为Rev-erbα调控Pck1转录的关键元件。SR9009也可抑制PCK1启动子（-2000/+100bp）转录活性，预测的结合位点与Pck1-RevRE位点具有很强的同源性。 结论： 激动Rev-erbα可下调肝脏中Pck1的表达，从而抑制糖异生途径，降低血糖水平。提示，Rev-erbα具有作为糖尿病药物靶点的潜在性。