5个重要菊花品种高效不定芽再生体系的研究

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菊花Dendranthema×grandiflorum(Ramat)Kitam. 原产于中国,是世界最重要的花卉之一,每年都有丰硕的育种成果:包括大量切花和盆栽品种。然而,长期以来花卉育种者无法用传统的育种方法培育出蓝色花品种。20世纪70年代兴起的转基因技术成为一种新兴的育种手段,可以弥补传统育种方式的不足,加快菊花的育种进程,尤其在花色、花型、株高、株型、光敏感性和抗病虫等性状改良方面起着重要作用,极大地拓宽了蓝色花菊花品种的育种途径。但是,菊花转基因具有品种特异性强、转化率低等特点,成功的转基因首先依赖于建立良好的再生体系。 本研究以4个白色花和1个粉色花菊花品种为试验材料,以叶片为外植体进行组织培养,获得了其中4个品种的试管苗,并通过直接诱导不定芽的方式建立了切花菊品种‘荷兰白’的再生体系。研究结果表明:温室中的菊花嫩叶作为外植体诱导分化不定芽的频率很低(0~60%),品种特异性强,分化能力受培养基中植物生长调节剂的浓度、叶片接种方向和取材季节的影响很大,而且外植体容易褐化;而以试管苗的叶片为外植体进行再生则相对容易;扩繁‘荷兰白’和‘白芍药’品种试管苗的最佳培养基分别为MS和MS+NAA0.05mg/L;这2个品种试管苗的最佳生根培养基为1/2MS+NAA0.1mg/L,生根率和移栽成活率达100%;将‘荷兰白’试管苗的第4~6片叶片剪成0.6cm~2左右的叶盘,近轴面接触培养基接种在MS+NAA0.5mg/L+6-BA1.0mg/L的培养基上,经过6w的培养其再生率可达93.5%。 以上研究成果为今后蓝色花菊花品种的转基因育种奠定了坚实的基础,也为菊花再生体系的研究提供了一定依据。
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