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现代研究证明,茶树菇多糖具有抗氧化和抗衰老等多种生理功能,是活性多糖的重要来源之一。白藜芦醇是存在于植物中的天然抗氧化剂,大量的体内体外试验表明,白藜芦醇在抗衰老作用中也发挥着重要作用。将茶树菇多糖与白藜芦醇复配研究其抗衰老作用,具有很好的应用前景。本研究通过设计单因素和正交试验提取茶树菇多糖,确定了最佳提取工艺;通过茶树菇多糖与白藜芦醇复配,研究其体外抗氧化和体内小鼠实验的协同抗衰老作用。1.采用热水浸提法提取茶树菇多糖,选取提取温度、提取时间和料液比作为考察因素,并设计正交试验,以葡萄糖含量为测定指标。结果表明,茶树菇多糖最佳提取工艺条件为:提取时间3.0h,提取温度95℃,料液比1:40,此时多糖得率为3.18%。2.采用DPPH自由基、ABTS自由基、羟基自由基和还原力四个指标,研究茶树菇多糖及其与白藜芦醇复配的体外抗氧化能力。结果表明,茶树菇多糖对自由基的清除作用和还原力,均随着浓度的增加而增强。茶树菇多糖与白藜芦醇复配物的半抑制浓度(IC50)低于单一组分,且联合指数(CI)均小于1,表明复配物在该评价体系中均表现出显著的协同作用。3.采用过氧化氢(H2O2)诱导建立MRC-5细胞衰老模型,四唑盐比色法(MTT法)检测茶树菇多糖和白藜芦醇对细胞活力的影响;银染法(TRAP法)检测细胞端粒酶活性;比色法测定细胞中GSH含量;流式细胞术分析细胞周期。结果表明:1)茶树菇多糖和白藜芦醇干预后,衰老细胞代谢活力随浓度增大而增强,且复配组的细胞存活率显著提高;2)衰老细胞中端粒酶活性和GSH含量较空白组显著下降;与模型组相比,所有药物干预组均显著提高GSH和端粒酶活性;复配组GSH和端粒酶活性优于单一组分,表明复配具有协同抗细胞衰老作用。3)细胞周期结果表明,茶树菇多糖与白藜芦醇可延缓G1期细胞阻滞现象,促进细胞增殖;且复配物可显著提高S期细胞比例,具有协同促进细胞增殖。4.采用D-半乳糖皮下注射建立衰老小鼠模型,茶树菇多糖和白藜芦醇及其复配物连续灌胃8周,测定小鼠体重变化;研究衰老模型对血液指标和生化指标的影响;测定小鼠肝组织中SOD、GSH-Px、CAT、T-AOC和MDA含量的影响;采用HE染色观察肝组织病理学改变。结果表明:1)衰老小鼠血清中ALT和AST的含量显著降低,而小鼠的体重、血细胞和血脂指数均无显著性差异;2)与空白组比较,衰老模型组雌、雄小鼠肝组织中SOD、T-AOC、GSH-Px和CAT活性显著下降,MDA含量增加。与衰老模型组比较,多糖组能显著提高各抗氧化酶的活性,同时降低MDA含量。复配组表现出了协同抗衰老作用,且雄性小鼠抗衰老作用更明显;3)HE染色观察衰老雄性小鼠的肝组织正常组织结构消失,其他药物干预组破坏程度较模型组轻,且复配物对衰老小鼠肝脏组织具有一定的保护用。综上所述可得出,茶树菇多糖与白藜芦醇在体内和体外实验中都具有较强的抗氧化作用,两者复配后作用明显提升。研究其协同抗衰老作用,为复合抗衰老药物的研发提供了一定的理论参考。