食欲素A对绵羊卵巢颗粒细胞增殖、成熟及功能影响的研究

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:decet
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食欲素作为下丘脑重要的神经肽,在生殖器官和脑部各区域广泛投射进而调节生命活动。食欲素受体在生殖系统中有表达,下丘脑食欲素和卵巢的E2有相互影响、相互具有正、负反馈调节的关系,通过下丘脑—垂体—性腺轴参与生殖机能的调控。卵巢颗粒细胞对卵泡和黄体的形成及其发育起重要的作用,此外,还有分泌性腺激素维持卵巢及黄体功能的作用。因此,探索食欲素在颗粒细胞生长发育过程中的作用对哺乳动物生殖机能的研究具有重要的理论及实践意义。  本实验以绵羊卵巢颗粒细胞作为研究对象,对其进行体外培养,并使其黄体化后添加0.05、0.2、0.5、1μg/mL四个浓度的食欲素A分别作用0、2、6、12、24、48h。运用qPCR、Western Blot及激光共聚焦扫描技术研究食欲素A对颗粒细胞生长发育过程中的影响。研究结果如下:  1.食欲素A刺激黄体化颗粒细胞对CYP11、StAR及3β-HSD mRNA表达量具有调控作用。添加四个剂量组食欲素A,随着时间的延长CYP11、StAR及3β-HSD基因的表达量均有明显的上升趋势;食欲素A在24h及48h CYP11、StAR及3β-HSD基因的表达量都明显高于其他时间的四个剂量组;食欲素刺激48h显著提高CYP11、StAR及3β-HSD mRNA的表达。  2.食欲素A刺激黄体化颗粒细胞,可有效刺激P-AMPK和P-ERK1/2蛋白的表达,添加食欲素A2h和6h,P-AMPK表达量在0.05μg/mL剂量组和0.1μg/mL剂量组表达量均显著提高,12h至24h,相同剂量组表达量逐渐降低;添加食欲素A2h,0.05μg/mL和0.1μg/mL剂量组P-ERK表达量显著提高,6h至24h,0.05μg/mL剂量组基本达到平台期,而0.1μg/mL剂量组表达量在6h至12h的平台期后24h表达量显著提高。表明食欲素A对黄体化颗粒细胞的生长及发育有积极的调控作用。  3.食欲素A刺激黄体化颗粒细胞对CYP11、StAR及3β-HSD蛋白的表达量具有显著调控作用。在24h和48h对CYP17、StAR及3β-HSD蛋白表达表达量与mRNA表达表达量相一致。
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