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本文以一株四川土壤中分离得到的真菌ZME为研究对象,进行了菌株鉴定、培养基筛选、菌株的发酵、次生代谢产物的分离纯化和结构解析。 首先对真菌ZME进行菌种鉴定,利用引物ITS1和ITS4通过PCR扩增出真菌ZME的ITS1-5.8S-ITS2rDNA,其序列在NCBI数据库中进行Blast比对,发现与BeauveriafelinaEN135的ITS序列有100%的相似性;以根霉菌Rhizopusoryzae作为外群构建系统进化树,真菌ZME与Beauveriafelina以99%的Bootstrap值分类到同一分枝上,进化关系最近,与Blast结果一致;结合菌株ZME在PDA平板培养基上培养的生长形态(菌丝体呈丝状生长)和显微观察结果(菌丝有横隔,菌丝多次二叉分支并产生孢子)初步判断菌株ZME属于子囊菌门(Ascomycota)、粪壳菌纲(Sordariomycetes)、肉座菌目(Hypocreales)、白僵菌属(Beauveria)中的Beauveriafelina。 接着使用三种不同培养基(察氏培养基、PDB培养基和萨氏培养基)对菌株ZME培养发酵并检测其抗菌活性、TLC图谱和LC-MS图谱差异性,发现使用PDB培养基时产生了较强的抗枯草芽孢杆菌活性代谢产物,这是在Beauveriafelina中首次报道产具有抗细菌活性物质,而使用其他两种培养基时没有发现抗菌代谢产物;TLC检测和LC-MS检测同样也存在差异斑点和差异色谱峰;通过对培养时间的选择,确定菌株ZME在PDB培养基中培养6d,抗菌活性物质产量达到最大。 最后以抗细菌活性跟踪为导向,对菌株ZME的活性物质进行分离,同时也对其他代谢物也进行分离纯化,菌株ZME的代谢物粗提物通过硅胶柱层析和半制备HPLC分离纯化共得到6个单体化合物1-6;通过对6个单体化合物的质谱分析和NMR检测,鉴定出这6个化合物分别为IsaridinB、IsaridinA、Reseocardin、RoseotoxinB、DestruxinB和麦角甾醇,化合物1-5均为环缩酚酸肽(cyclodepsipeptide)类化合物,其中首次报道reseocardin具有抗细菌活性。