研究目的:本研究旨在进行mi R-27a在肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)中的作用及丹参酮ⅡA(Tanshinone IIA,TIIA)抑制肝纤维化的机理研究。研究方法:(1)实时定量逆转录PCR(Real-time quantitative reverse transcription PCR,RT-q PCR)技术,检测mi R-27a的表达;MTS法检测细胞增殖情况;蛋白质印迹法检测相关蛋白表达情况;(2)体内实验用50%四氯化碳溶液1 ml/kg每周2次腹腔注射造模,第5周开始给药,第9周结束后取材,统计体重、肝重、肝指数,并进行组织病理学、肝组织羟脯氨酸含量、血清肝功能及肝组织胶原蛋白I型α2(Collagen alpha-2(I),COL1A2)、α平滑肌肌动蛋白(alpha smooth muscle actin,α-SMA)含量检测;(3)利用相关网站完成对丹参酮ⅡA潜在靶点和肝纤维化相关基因数据库的构建;用KEGG数据库进行GO和Pathway分析;用Cytoscape进行网络构建和核心靶点筛选。研究结果:(1)mi R-27a在活化的HSC中高表达、并能够被活化的HSC释放到细胞外;mi R-27a过表达能够促进HSC活化,抑制mi R-27a表达可以抑制HSC的增殖和活化(P<0.05);丹参酮ⅡA能够随时间呈浓度依赖地抑制LX2细胞的增殖和活化;TIIA抑制活化的HSC中mi R-27a的表达(P<0.01),mi R-27a过表达拮抗TIIA抑制HSC活化作用;(2)体内实验,TIIA干预能使CCl4诱导肝纤维化大鼠体重回升、肝指数降低(P<0.05);TIIA可以改善CCl4诱导肝纤维化大鼠肝细胞脂肪样变性和肝组织胶原沉积(P<0.01);TIIA能够降低CCl4诱导肝纤维化大鼠肝组织羟脯氨酸和血清ALT、AST、ALP、Tbil含量;TIIA干预能够减少CCL4诱导肝纤维化大鼠肝组织中COL1A2和α-SMA的表达(P<0.05);(3)体内实验,TIIA能够抑制CCl4诱导肝纤维化大鼠肝组织中高表达的C-JUN、C-MYC、MMP9、PI3K、P38的蛋白表达;体外实验,TIIA能够下调在活化的HSC中高表达的C-JUN、P-C-JUN、C-MYC、CCND1、MMP9、P65、P-P65、IKBA以及PI3K、CAS9、P38的蛋白表达;mi R-27a过表达促进TIIA潜在靶点C-JUN、C-MYC、PI3K的蛋白表达,同时mi R-27a过表达拮抗TIIA对这些蛋白表达的抑制作用。结论:(1)TIIA在体内外均具有较好的抗肝纤维化作用;(2)TIIA抗肝纤维化作用与降低C-JUN、P-C-JUN、C-MYC、CCND1、MMP9、P65、P-P65、IKBA以及PI3K、CAS9、P38的蛋白表达有关;(3)TIIA下调促纤维化小分子mi R-27a的表达可能是其抗肝纤维化的机制之一,其中C-JUN、C-MYC、PI3K或许参与了这一机制。