新城疫热稳定性天然弱毒B株融合蛋白基因的克隆及其核酸疫苗的构建

来源 :河北农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：kokwok

【摘要】

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利用从国外引进的新城疫热稳定性天然弱毒B株接种SPF鸡胚繁殖病毒,经处理后提取病毒的基因组RNA,参考国内外发表的NDV融合蛋白基因序列,设计一对特异性引物,经反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增出约1700bp大小的特异性片段,将此片段回收纯化后,利用T-A克隆技术将其克隆到PGEM-T-easy克隆载体中,再转化大肠杆菌JM109感受态细胞.转化后经分子量比较、PCR鉴定和酶切分析筛选阳性

【作者】

：

侯绍华

【机构】

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河北农业大学

【出处】

：

河北农业大学

【发表日期】

：

2003年4期

【关键词】

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新城疫病毒

【基金项目】

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利用从国外引进的新城疫热稳定性天然弱毒B<,95>株接种SPF鸡胚繁殖病毒,经处理后提取病毒的基因组RNA,参考国内外发表的NDV融合蛋白基因序列,设计一对特异性引物,经反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增出约1700bp大小的特异性片段,将此片段回收纯化后,利用T-A克隆技术将其克隆到PGEM-T-easy克隆载体中,再转化大肠杆菌JM109感受态细胞.转化后经分子量比较、PCR鉴定和酶切分析筛选阳性克隆.

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