拟南芥液泡膜Na<'+>/H<'+>反向运输器(AtNHX1)抗体制备以及转AtNHX1基因烟草耐盐性的研究

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该研究利用RT-PCR的方法从拟南芥(C型)中扩增得到1.6kb的片段并与载体连接得到克隆载体pT-AtNHX1.构建原核表达载体pEX-AtNHX1并转入大肠杆菌JM19(DE3)中表达融合蛋白NHX32,用Ni-NTA superflow亲和柱纯此蛋白并免疫兔子,获得的抗血清效价为1:1000.构建一个由CaMV 35S启动子控制AtNHX1表达的植物表达载体pBI121-AtNHX1并由农杆菌介导转化烟草(K326).利用PCR和Southern杂交方法鉴定再生植株,共获得27颗转基因阳性苗.当培养基中NaCl浓度低于或等于200mM时,转AtNHX1基因植株的生长几乎不受影响.AtNHX1基因的表达能明显提高烟草的耐盐能力.这些结果预示着我们能够利用异源的液泡膜Na<+>/H<+>反向运输器基因改造植物尤其是经济作物的耐盐性.
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