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目的偏头痛慢性化的机制还不完全清楚。目前主要认为中枢敏化是偏头痛慢性化的一个主要病理生理机制,而中枢敏化又表现为神经元的兴奋性增高,突触可塑性发生改变。我们之前的研究也表明在偏头痛的慢性化过程中有突触可塑性的改变。EphBs受体及其配体ephrinBs是受体酪氨酸激酶家族的成员,众多研究表明其对中枢神经系统突触可塑性的调节至关重要。因此,本研究旨在探索ephrinB/EphB是否能调控突触可塑性进而参与偏头痛的慢性化。方法1.通过硬脑膜反复滴注炎性汤(IS)构建大鼠慢性偏头痛(CM)模型并进行模型评价;然后使用qPCR,WB和免疫荧光等技术检测EphB2和ephrinB2在三叉神经尾侧脊束核(TNC)的表达水平以及分布情况;侧脑室给予EphB受体抑制剂(EphB1-Fc)后,检测大鼠的缩足反应阈值(PWT)和缩足反应潜伏期(PWL),评估ephrinB/EphB在CM中的作用。2.侧脑室给予EphB1-Fc后,用WB检测三个突触相关蛋白的表达、Golgi-cox染色法探索神经元树突棘的变化以及用透射电镜观察突触的超微结构,探索ephrinB/EphB对CM突触可塑性的影响;同时在侧脑室注射EphB1-Fc后,用WB检测中枢敏化两个相关指标SP和c-Fos的变化以及TNC部位NR2B、pNR2B、CaMKII、CREB、pCREB的表达,研究ephrinB/EphB在偏头痛慢性化过程中的作用机制。结果1.硬脑膜滴注IS后PWT和PWL明显降低、TNC部位CGRP的表达增加,表明CM模型构建成功;并且CM组EphB2和ephrinB2的mRNA和蛋白表达都显著高于sham组,表明CM中可能有EphB2和ephrinB2的激活;应用EphB受体抑制剂后缓解了PWT和PWL的降低以及阻止了CGRP的表达,表明ephrinB/EphB在CM中可能具有调控作用。2.EphB1-Fc明显阻止了CM突触可塑性的改变,并且抑制了CM组SP荧光强度的增加和c-Fos表达的增加,表明ephrinB/EphB可能通过调控突触可塑性,导致中枢致敏;此外,WB结果显示侧脑室注射EphB1-Fc降低了CM大鼠pNR2B、CaMKII以及pCREB的表达,说明ephrinB/EphB在偏头痛慢性化过程中的调控作用可能涉及NR2B的磷酸化以及CaMKII/CREB途径。结论以上结果显示,在偏头痛慢性化过程中可能有EphB2和ephrinB2的激活,抑制EphB受体能减轻CM突触可塑性的改变,以及中枢敏化相关指标的变化。由此表明ephrinB/EphB可能通过调控突触可塑性参与中枢敏化,进而导致偏头痛的慢性化。故阻断ephrinB/EphB信号通路则可能阻止偏头痛慢性化的发展。