本文对100种单味中药、中药复方和中药中单体化合物进行了酪氨酸酶活性的研究,从中选择具良好抗酪氨酸酶活性的麦冬展开研究,寻找其活性成分。旨在为科学开发具有酪氨酸酶抑制作用的中药,扩大中药及麦冬的应用范围利用提供科学依据,为更好应用中药提供理论基础。 从100种药物中筛选出酪氨酸酶抑制剂54种(包括单体化合物、中药及中药复方),其中牡丹花、桃仁、乌药叶、钱王红白散、三白汤的酪氨酸酶抑制作用为首次报道。测定了14种酪氨酸酶抑制剂半数抑制率(IC50)值,单体化合物中槲皮素的活性最好,半数抑制率值为69.5μM,比同等条件下Vc半数抑制率值390μM(68.8μg/ml)小；单味中药中活性最好的为牡丹花,其半数抑制率值为93.97μg/ml,复方中以钱王红白散及三白汤为佳。 对槲皮素、黄芩素、黄芩苷、豆蔻明等黄酮类化合物的酪氨酸酶抑制活性和结构的关系进行了初步探讨。 首次系统的研究了中药麦冬对酪氨酸酶的抑制作用和机理。发现麦冬对酪氨酸酶的抑制类型为混合型-竞争非竞争型,并且测定了对酪氨酸酶的抑制常数。表明麦冬不仅可以直接抑制酪氨酸酶,还可以与底物竞争酶-底物络合物。其抑制常数还表明麦冬对游离酪氨酸酶的抑制作用强于酶-底物络合物。麦冬还具有具有良好的抗DPPH自由基氧化作用,这也是麦冬削弱酪氨酸酶供氧机制的原理之一。 采用活性追踪的方法,发现了麦冬抑制酪氨酸酶作用的活性部位,经测定其半数抑制率值为97.9μg/ml。 应用HPLC-ESI-MSn的方法对麦冬抑制酪氨酸酶活性组分进行了分析。结果表明该活性组分中以高异黄酮类化合物为主,通过对这些化合物的一级、二级质谱信息研究,探讨了高异黄酮类化合物的裂解规律,推导出麦冬抑制酪氨酸酶活性组分中主要成分为:Methylophiopogonanone A,5,4-dihydroxy-7,3-dimethoxy-8-methylhomoisoflavanone,Methylophiopogonanone B,2,5,7-trihydroxy-6,8-dimethyl-3-(3,4-methylenedioxylbenzyl)-chrman-4-one,6-formyl-isoophiopogonanone A。