杏白灵是杏鲍菇与白灵菇进行种间杂交得到的新菌株,该菌株遗传了白灵菇与杏鲍菇的遗传特性。本实验室前期已经对白灵菇与杏鲍菇种间杂交育种进行了研究,并得到了一些杏白灵菌株。为了探明杏白灵菌株的遗传规律和对白灵菇与杏鲍菇种间杂交的遗传进行分析,本课题展开了一系列实验工作,结果如下:1 杏白灵快速鉴定技术的建立通过对白灵菇与杏鲍菇菌株的ITS序列分析,可用Dra Ⅰ酶将白灵菇与杏鲍菇菌株区分,在细胞核水平上建立ITS-RFLP技术鉴别白灵菇与杏鲍菇菌株。对白灵菇与杏鲍菇菌株进行EF1 α序列分析,可用Dde Ⅰ酶将白灵菇与杏鲍菇菌株区分,在细胞质水平上建立EF1 α-RFLP技术鉴别白灵菇与杏鲍菇菌株。白灵菇与杏鲍菇的杂交菌株杏白灵经ITS-RFLP和EF1 α-RFLP分析,结果显示杏白灵菌株融合了白灵菇与杏鲍菇的遗传物质。此外对杏鲍菇与白灵菇菌株的RNS序列分析可知,白灵菇与杏鲍菇菌株的RNS序列差异出现在V4可变区,在214—216bp处,杏鲍菇菌株有2个A碱基,而白灵菇菌株缺少这二个碱基,在241bp处,杏鲍菇菌株为A碱基,而白灵菇菌株为G碱基。2 杏白灵遗传规律研究对所获得的34个XB54单孢菌株进行ITS-RFLP及序列分析,将单孢分成三类:第一类酶切带型为杏鲍菇;第二类酶切带型为白灵菇;第三类酶切兼有白灵菇与杏鲍菇的带型和特殊的ITS片段。进一步对第三类特殊单孢菌株进行原生质体单核化及ITS序列分析,结果表明第三类单孢中存在多个细胞核,属于异核体单孢。应用ISSR和RAPD二种分子标记对单孢菌株进行多态性分析,筛选出5个多态性标记引物,扩增出36条多态性条带,经NTSYS软件分析条带,构建单孢聚类分析图可知,XB54单孢可以分为杏鲍菇与白灵菇两类,而且从已有的菌株数目分析,分离的概率相同。随机选取20个XB54单孢菌株进行交配型分析,得到杏白灵单孢交配成功率为6.5%,不符合四极性蕈菌的分离规律,属于特殊的遗传分离现象。通过将XB54单孢菌株与白灵菇、杏鲍菇、阿魏蘑单孢菌株进行试管配对,得到新的杂交菌株,进行出菇实验,可知XB54单孢具有可育性。3 杏白灵单孢核迁移研究初探通过平板杂交实验,挑取偏向一侧的杂合子,进行ITS-RFLP技术验证是否存在细胞核的迁移。结果显示,杏白灵单孢菌株和杏鲍菇或者白灵菇配对存在一定的不确定性,控制细胞核融合的基因取决于何种基因尚需要进一步的研究。