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胞浆内单精子注射(ICSI)是常用的辅助生殖技术,属于显微受精技术的一种,常用于治疗雄性不育和精卵互作的研究。本研究的目的是通过ICSI对水牛-猪异种显微受精原核形成和早期胚胎发育情况进行初步探讨,以便为水牛-猪精卵互作的研究提供参考数据。试验一探讨了水牛精子和猪卵母细胞的显微受精情况,结果发现将水牛精子注射到猪卵母细胞中可以形成双原核,但双原核形成率显著低于注射猪精子的同种注射卵组(20.75%VS 38.60%,p<0.05)。分裂率上注射水牛精子组与假注射组、注射猪精子组相比差异不显著(78.20%VS 75.00%和86.15%,p>0.05),但假注射组显著低于注射猪精子组(75.00%VS 86.15%,p<0.05)。假定囊胚率上假注射组与注射水牛精子组、注射猪精子组相比差异不显著(28.79%VS 22.56%和34.62%,p>0.05),而注射水牛精子组显著低于注射猪精子组(22.56%VS 34.62%,p<0.05)。而假定囊胚细胞数上,假注射组、猪精子组和水牛精子组之间没有显著差异(53.80±10.60 VS 54.90±9.89 VS 54.75±10.98,p>0.05)。试验二是探讨不同的培养体系对水牛-猪异种注射卵发育的影响。假定囊胚率上,无论是注射水牛精子还是猪精子,注射卵在PZM-3、SOF和先培养在PZM-3中2 d再换到SOF(P-SOF)培养的组中,都是PZM-3组假定囊胚率显著高于SOF和P-SOF组(18.63%VS 2.94%和1.00%,28.30%VS6.73%和1.98%,p<0.05)。试验三探讨5-氮杂胞苷(5-Azacytidine,5-AzaC)对水牛-猪异种注射卵的影响。结果表明用10μM的5-AzaC处理水牛精子12 h后,培养在PZM-3组的双原核形成率和培养在添加10μM 5-AzaC的PZM-3组(5A-PZM)相比差异不显著(15.69%VS 9.09%,p>0.05)；类似的,注射未经处理的水牛精培养在PZM-3组的双原核形成率与5A-PZM组相比差异不显著(11.11%VS8.77%,p>0.05)。在分裂率和假定囊胚率方面,培养在PZM-3中,经处理的水牛精子组分裂率显著高于未经处理的水牛精子组(91.53%VS 82.44%,p<0.05),假定囊胚率差异不显著(33.9%VS 31.30%,p>0.05)。此外,假定囊胚细胞数上,培养在PZM-3和5A-PZM中,经5-AzaC处理的水牛精子组与未经处理的水牛精子组差异不显著(分别为52.35±10.40 VS 49.15±11.96和51.70±9.75 VS 44.40±7.39,p>0.05)。以上结果说明：(1)水牛精子注射到猪卵母细胞中可以形成雄原核。(2)水牛-猪异种显微受精可以为精子质量评估提供理论参考。(3)猪卵母细胞可用于与水牛精子进行异种受精的研究。