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目的:研究不同浓度β-glycerophosphate对DPSCs向成牙本质细胞分化的影响;探讨在不同时间点,分化成熟相关蛋白DSP和MEPE在不同浓度β-glycerophosphate诱导下表达的变化,从而找到诱导DPSCs分化的最佳β-glycerophosphate浓度。方法:分离培养人DPSCs,免疫荧光法检测干细胞特异性抗体STRO-1的表达;用不同的诱导液诱导DPSCs分别向脂肪细胞,神经细胞,成骨细胞分化,证实其多向分化能力。向脂肪细胞诱导3周后行油红染色,神经向诱导后检测nestin表达是否阳性,向成骨细胞诱导21天用AlizarinRedS检测矿化结节形成情况;用四种浓度的β-glycerophosphate及不含β-glycerophosphate的矿化诱导培养液培养DPSCs,MTT法检测四种浓度的β-glycerophosphate对细胞增殖是否有抑制作用;分别在第7,14,21,28天提取各组细胞蛋白,Westernblot检测MEPE和DSP的表达情况。培养至28天时,AlizarinRedS矿化结节染色,CPC提取法比较各组形成矿化结节的量。结果:1、干细胞特异性抗体STRO-1表达阳性;2、DPSCs经过诱导可向脂肪细胞,神经细胞,成骨细胞分化;3、MTT结果显示,4种浓度的β-glycerophosphate对DPSCs的增殖无抑制作用;4、Westernblot结果显示随着β-glycerophosphate浓度的增加DSP表达下调,伴随MEPE表达改变;5、矿化组与对照组相比,矿化组对MEPE表达有抑制作用。6、矿化结节检测显示所有组都成功矿化,而5mMβ-glycerolphosphate组形成矿化结节量最多。结论:DPSCs向成牙本质细胞的分化程度与β-glycerophosphate浓度密切相关。矿化组对MEPE蛋白表达有明显的抑制作用,尤其5mMβ-glycerolphosphate组。所以低浓度(5mM)β-glycerophosphate是促进DPSCs成熟和分化的最优浓度。同时,MEPE与DSP的表达情况可做为DPSCs向成牙本质细胞分化程度的参考指标,即低表达的MEPE和高水平的DSP可被用来评价DPSCs的分化情况。故改变β-glycerolphosphate的浓度来维持成牙本质细胞显型,获得更好的分化,从而促进牙发生是十分有意义的。